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herbal

金虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 3934.2
散金: 43
红花: 2
帖子: 751
在线: 262.3小时
虫号: 385276
注册: 2007-05-28
专业: 光谱分析

[交流] 【求助】关于细胞试验已有3人参与

请教大家：
关于细胞毒性、黏附、增殖、分化试验，这几个之间有什么区别和联系呢？都采用什么方法做？时间点怎么设计？要注意什么问题？
谢谢！

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1楼 2010-09-27 10:21:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 7040
散金: 22
帖子: 352
在线: 57.5小时
虫号: 720016
注册: 2009-03-11
性别: GG
专业: 其他无机非金属材料

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-05-14 06:41:28

细胞毒性：狭义的毒性实验和增值实验相差不多，很多文章都是通用的。但广义的细胞毒性试验就有差别了。就说一下狭义的吧，毒性试验也就是增值实验，采用的方法一般有MTT,Alamar Blue还有检测总的cDNA含量，这些方法都可以做。建议你看一篇文章，题目是“Analytical methods to assess nanoparticle toxicity”，是一篇综述，很不错。里面很系统的讲过增值或者说毒性实验的各种方法的优缺点。

黏附：黏附实验主要是检测细胞对材料的喜好程度，如果是做那种陶瓷片或者涂层的致密材料一般都是做24h的，检测方法有SEM和荧光染色，这两种方法我个人觉得没太大差别，但荧光图一般都比较漂亮能给自己的文章加分。如果是做多孔支架材料的话，可以选择多做几个时间点。有文章做了1,3,7天这三个点，看的细胞在支架内部的生长情况。看别人做的结果，还是有区别的。

增殖：同上。

分化：这块就要看你是做什么材料了。我主要是做骨修复材料，所以一般都是检测成骨化的表征。这方面能做的东西非常多。拿我做的方向来说明问题吧，MSC早期分化的表征一般都是选择ALP(碱性磷酸酶)，可以做的检测有ALP染色，也有通过pNPP方法来定量检测材料对细胞的分化的影响。中晚期分化的表征可以检测Osteocalcin(OC), Osteopontin(OP), BSP, ALP, Runx2这些都是成骨标志基因，检测方法也很多有RT-PCR，Real time RT-PCR还有荧光定量PCR，这些方法都可以用于检测。可以根据自己的需要来做