24小时热门版块排行榜

返回列表

dh2007108045

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 282
散金: 2
帖子: 23
在线: 7.4小时
虫号: 1079774
注册: 2010-08-22
性别: GG
专业: 食品

[交流] 【求助】关于用液相进行甲醇测试的问题

本人刚来到一实验室工作，使用一台安捷伦1200。近期，遇到这样一个问题，用甲醇做溶剂的样液，总是出现杂峰，即使测试标准品，也出现奇怪的峰。所以怀疑是甲醇的问题。手上有MERK和TEDIA两个品牌的甲醇，都做了测试。使用的是ZOBAX C-18 250mm的柱子。254、230、220nm的紫外检测。进样为1ul的纯甲醇，初始流动相为5%醇甲醇，30分钟时间梯度洗脱至100%的甲醇。保持10分钟。然后再用10分钟时间，变回5%的甲醇浓度。出了一个很小的溶剂峰，但是出峰时间很不稳定，来回波动。我在相同条件下，连续进了6针，第一针在30分钟左右出现了一堆杂峰。但是接下来5针就比较干净。

本人分析，干扰因素有如下：1，柱子是旧柱子，可能会有一些杂质的干扰。2， 1200的泵压力不稳，基线漂移的很厉害。

请有类似经验的高手指教，指出我方法的不足之处，谢谢！

回复此楼

» 猜你喜欢

博士读完未来一定会好吗已经有23人回复
导师想让我从独立一作变成了共一第一已经有7人回复
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗已经有11人回复
读博已经有4人回复
JMPT 期刊投稿流程已经有4人回复
心脉受损已经有5人回复
Springer期刊投稿求助已经有4人回复
小论文投稿已经有3人回复
申请2026年博士已经有6人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

不抛弃，不放弃

1楼2010-09-02 21:27:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 5428.6
红花: 3
帖子: 438
在线: 142.2小时
虫号: 1065147
注册: 2010-07-27
性别: MM
专业: 色谱分析

“泵的压力不稳”是不是进气泡了

赞一下

回复此楼

2楼2010-09-03 07:46:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hellohygo

应助: (幼儿园)
在线:
虫号: 272223

建议先将柱子好好冲冲！

赞一下

回复此楼

3楼2010-09-03 10:31:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yangliu77

木虫 (著名写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5912.9
红花: 1
帖子: 1015
在线: 58小时
虫号: 819167
注册: 2009-07-31
性别: MM
专业: 色谱分析

★ ★ ★
dh2007108045(金币+1): 2010-09-04 07:33:11
happy169(金币+3):感谢回复！ 2010-09-10 10:41:39

你这方法可行吗？
我没见过液相的流动相纯度这样测的。杂峰或溶剂峰估计是流动相梯度改变太快造成的。问题是你进1微升的甲醇，流动相里也有甲醇，如果你进1微升甲醇可以出溶剂峰的话，那常规做实验时，样品溶剂若是甲醇的话，液相的图谱里就个个都有溶剂峰了。可一般只有气相图谱才有溶剂峰。
你是用什么进样器？自动进样器，六通阀？液相一般进样量要比较多，如果是六通阀的话，其本身有损耗，估计你进1微升，相当于没进。
还有的问题是，你的流动相梯度转变太快了，30分钟之内从5%到100%甲醇，保持后，又在10分钟之内从100%甲醇到5%。太快了，基线漂移严重外，还可能出现宽峰等畸形峰。

其实，你要看甲醇有没问题，你先不进任何样，跑个空白，看有没杂峰；进常量的溶剂——甲醇，看有没杂峰。如果空白有杂峰，那就是柱子污染；如果空白没有杂峰，溶剂空白有杂峰，情况不是柱子有残留，就是溶剂存在污染，最好用最新买的溶剂验证下。
另外，不知道你流速设为多少，跑样前有无排气泡，进样前基线是否已经稳定，很多问题都会影响压力及图谱出峰状况的。

赞一下(1人)

回复此楼

4楼2010-09-03 10:45:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖