应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】关于用液相进行甲醇测试的问题
51/1返回列表
查看: 2708  |  回复: 10
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dh2007108045

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】关于用液相进行甲醇测试的问题

本人刚来到一实验室工作，使用一台安捷伦1200。近期，遇到这样一个问题，用甲醇做溶剂的样液，总是出现杂峰，即使测试标准品，也出现奇怪的峰。所以怀疑是甲醇的问题。 手上有MERK和TEDIA两个品牌的甲醇，都做了测试。使用的是ZOBAX C-18 250mm的柱子。254、230、220nm的紫外检测。 进样为1ul的纯甲醇，初始流动相为5%醇甲醇，30分钟时间梯度洗脱至100%的甲醇。保持10分钟。然后再用10分钟时间，变回5%的甲醇浓度。 出了一个很小的溶剂峰，但是出峰时间很不稳定，来回波动。我在相同条件下，连续进了6针，第一针在30分钟左右出现了一堆杂峰。但是接下来5针就比较干净。

    本人分析，干扰因素有如下：1，柱子是旧柱子，可能会有一些杂质的干扰。2， 1200的泵压力不稳，基线漂移的很厉害。

请有类似经验的高手指教，指出我方法的不足之处，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不抛弃，不放弃
1楼2010-09-02 21:27:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dh2007108045

银虫 (初入文坛)
自动进样器，流速0.4ml/min。

跑过空白，无杂峰。

在进样之前，用纯甲醇冲了很久的柱子，现在想想应该不是柱子的问题。

基线波动太大可能与梯度太陡有关，我最近再试一下。
赞一下 回复此楼
不抛弃，不放弃
5楼2010-09-04 07:44:28
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)
“泵的压力不稳”是不是进气泡了
赞一下 回复此楼
2楼2010-09-03 07:46:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellohygo

建议先将柱子好好冲冲！
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-03 10:31:04
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangliu77

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
dh2007108045(金币+1): 2010-09-04 07:33:11
happy169(金币+3):感谢回复！ 2010-09-10 10:41:39
你这方法可行吗？
我没见过液相的流动相纯度这样测的。杂峰或溶剂峰估计是流动相梯度改变太快造成的。问题是你进1微升的甲醇，流动相里也有甲醇，如果你进1微升甲醇可以出溶剂峰的话，那常规做实验时，样品溶剂若是甲醇的话，液相的图谱里就个个都有溶剂峰了。可一般只有气相图谱才有溶剂峰。
你是用什么进样器？自动进样器，六通阀？液相一般进样量要比较多，如果是六通阀的话，其本身有损耗，估计你进1微升，相当于没进。
还有的问题是，你的流动相梯度转变太快了，30分钟之内从5%到100%甲醇，保持后，又在10分钟之内从100%甲醇到5%。太快了，基线漂移严重外，还可能出现宽峰等畸形峰。

其实，你要看甲醇有没问题，你先不进任何样，跑个空白，看有没杂峰；进常量的溶剂——甲醇，看有没杂峰。如果空白有杂峰，那就是柱子污染；如果空白没有杂峰，溶剂空白有杂峰，情况不是柱子有残留，就是溶剂存在污染，最好用最新买的溶剂验证下。
另外，不知道你流速设为多少，跑样前有无排气泡，进样前基线是否已经稳定，很多问题都会影响压力及图谱出峰状况 的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-09-03 10:45:31
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭