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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】能否先在小柱上摸索洗脱条件 再改在大柱上使用
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喜洋洋1024

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】能否先在小柱上摸索洗脱条件 再改在大柱上使用 已有13人参与

我现在刚开始提取甾苷类物质 因为之前都没有过过柱子 看硕士论文上一般都是提取十斤左右中药 再过柱子分离 但是我怕一次过那么多要是中间搞不好把样品损失了 就太浪费了 所以想先取少量在小柱子上摸条件 再在大柱子上  用 可行否 望指教
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1楼 2010-09-02 08:03:49
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

babituo

金虫 (初入文坛)
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karl2100(金币+1):谢谢指教！ 2010-09-03 01:53:13
过大柱是粗分，只要接液时勤换下承接的三角瓶，一般500ml三角瓶接液200ml就换，既没问题。每接下四瓶就点板查看，板上点一样的就合瓶旋蒸，勤快些就不会出错。
分离前先TLC摸好条件，用TLC展开剂的条件走大柱就行。上样前炒好样，硅胶（4-5倍样品量，计算好柱中塔板数，留出加入流动相后的空间）上柱后先用流动相平衡好，样品加入后流动相要缓慢加入，前三次沿壁加入流动相刚没过样品即可，以后柱中流动相高度在慢慢增高。晚上人走后，记得封柱，流动相高度刚没过样品时封柱。
柱子最好不要走空，一走空就有气泡进入，影响分离。
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水的有风度
11楼2010-09-02 22:23:33
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普通回帖

1010004998

金虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-09-03 01:52:42
最好不要这样 做好TLC 直接上大柱子 粗点儿没有关系 冲不下来加大极性就是了 要是吸附的话小柱子也会吸附的
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2楼2010-09-02 08:38:28
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yangliguo007

木虫 (著名写手)
绕弯了，直接板子指导柱子就行。
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物竞天择，适者生存。
3楼2010-09-02 09:49:00
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wb1809v

木虫 (正式写手)
小柱子有个问题就是，含量少的化合物就不容易检测出来
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4楼2010-09-02 10:42:08
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0410zwj

铜虫 (初入文坛)
★
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其实直接过大柱子就行，不要怕，犯错了才能记住啊
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5楼2010-09-02 21:24:22
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zhaokan123

金虫 (正式写手)
★
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TLC摸好条件，指导柱层析，一般不用小柱子过渡
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自助者天助
6楼2010-09-02 21:33:49
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renxueqin

金虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by zhaokan123 at 2010-09-02 21:33:49:
TLC摸好条件，指导柱层析，一般不用小柱子过渡

对于我们过柱子新手来说，板子知道柱子有点难哦，还是经验不足，可能多过几根就知道咯
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7楼2010-09-02 21:36:20
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lemonwan

铁杆木虫 (著名写手)
★
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我觉得可以先小试一下，结合HPLC检测，可以知道你要的成分大概在什么部位。
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phytochemistryandnaturalproducts
8楼2010-09-02 21:42:42
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zhaokan123

金虫 (正式写手)
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karl2100(金币+1):谢谢提供！ 2010-09-03 01:52:57
提供一个经验数据给你供参考，TLC条件中洗脱性高的溶剂在柱层析时多用两倍。
如：TLC【DCM:MeOH=8:1】，柱16：1
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自助者天助
9楼2010-09-02 21:42:51
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zhaokan123

金虫 (正式写手)
打错了，洗脱性低的溶剂在过柱时多用两倍。。。
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自助者天助
10楼2010-09-02 21:43:33
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