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喜洋洋1024

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】能否先在小柱上摸索洗脱条件再改在大柱上使用已有13人参与

我现在刚开始提取甾苷类物质因为之前都没有过过柱子看硕士论文上一般都是提取十斤左右中药再过柱子分离但是我怕一次过那么多要是中间搞不好把样品损失了就太浪费了所以想先取少量在小柱子上摸条件再在大柱子上用可行否望指教

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1楼 2010-09-02 08:03:49

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babituo

金虫 (初入文坛)

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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢指教！ 2010-09-03 01:53:13

过大柱是粗分，只要接液时勤换下承接的三角瓶，一般500ml三角瓶接液200ml就换，既没问题。每接下四瓶就点板查看，板上点一样的就合瓶旋蒸，勤快些就不会出错。
分离前先TLC摸好条件，用TLC展开剂的条件走大柱就行。上样前炒好样，硅胶（4-5倍样品量，计算好柱中塔板数，留出加入流动相后的空间）上柱后先用流动相平衡好，样品加入后流动相要缓慢加入，前三次沿壁加入流动相刚没过样品即可，以后柱中流动相高度在慢慢增高。晚上人走后，记得封柱，流动相高度刚没过样品时封柱。
柱子最好不要走空，一走空就有气泡进入，影响分离。