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【求助】能否先在小柱上摸索洗脱条件 再改在大柱上使用 已有13人参与
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| 我现在刚开始提取甾苷类物质 因为之前都没有过过柱子 看硕士论文上一般都是提取十斤左右中药 再过柱子分离 但是我怕一次过那么多要是中间搞不好把样品损失了 就太浪费了 所以想先取少量在小柱子上摸条件 再在大柱子上 用 可行否 望指教 |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢指教！ 2010-09-03 01:53:13
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过大柱是粗分，只要接液时勤换下承接的三角瓶，一般500ml三角瓶接液200ml就换，既没问题。每接下四瓶就点板查看，板上点一样的就合瓶旋蒸，勤快些就不会出错。 分离前先TLC摸好条件，用TLC展开剂的条件走大柱就行。上样前炒好样，硅胶（4-5倍样品量，计算好柱中塔板数，留出加入流动相后的空间）上柱后先用流动相平衡好，样品加入后流动相要缓慢加入，前三次沿壁加入流动相刚没过样品即可，以后柱中流动相高度在慢慢增高。晚上人走后，记得封柱，流动相高度刚没过样品时封柱。 柱子最好不要走空，一走空就有气泡进入，影响分离。 |
11楼2010-09-02 22:23:33
2楼2010-09-02 08:38:28
yangliguo007
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