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喜洋洋1024

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】能否先在小柱上摸索洗脱条件 再改在大柱上使用 已有13人参与

我现在刚开始提取甾苷类物质 因为之前都没有过过柱子 看硕士论文上一般都是提取十斤左右中药 再过柱子分离 但是我怕一次过那么多要是中间搞不好把样品损失了 就太浪费了 所以想先取少量在小柱子上摸条件 再在大柱子上  用 可行否 望指教
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babituo

金虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢指教! 2010-09-03 01:53:13
过大柱是粗分,只要接液时勤换下承接的三角瓶,一般500ml三角瓶接液200ml就换,既没问题。每接下四瓶就点板查看,板上点一样的就合瓶旋蒸,勤快些就不会出错。
分离前先TLC摸好条件,用TLC展开剂的条件走大柱就行。上样前炒好样,硅胶(4-5倍样品量,计算好柱中塔板数,留出加入流动相后的空间)上柱后先用流动相平衡好,样品加入后流动相要缓慢加入,前三次沿壁加入流动相刚没过样品即可,以后柱中流动相高度在慢慢增高。晚上人走后,记得封柱,流动相高度刚没过样品时封柱。
柱子最好不要走空,一走空就有气泡进入,影响分离。
水的有风度
11楼2010-09-02 22:23:33
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普通回帖

1010004998

金虫 (小有名气)

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karl2100(金币+1):谢谢回帖! 2010-09-03 01:52:42
最好不要这样 做好TLC 直接上大柱子 粗点儿没有关系 冲不下来加大极性就是了 要是吸附的话小柱子也会吸附的
2楼2010-09-02 08:38:28
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yangliguo007

木虫 (著名写手)

绕弯了,直接板子指导柱子就行。
物竞天择,适者生存。
3楼2010-09-02 09:49:00
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wb1809v

木虫 (正式写手)

小柱子有个问题就是,含量少的化合物就不容易检测出来
4楼2010-09-02 10:42:08
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0410zwj

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
其实直接过大柱子就行,不要怕,犯错了才能记住啊
5楼2010-09-02 21:24:22
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zhaokan123

金虫 (正式写手)


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TLC摸好条件,指导柱层析,一般不用小柱子过渡
自助者天助
6楼2010-09-02 21:33:49
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renxueqin

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhaokan123 at 2010-09-02 21:33:49:
TLC摸好条件,指导柱层析,一般不用小柱子过渡

对于我们过柱子新手来说,板子知道柱子有点难哦,还是经验不足,可能多过几根就知道咯
7楼2010-09-02 21:36:20
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lemonwan

铁杆木虫 (著名写手)


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我觉得可以先小试一下,结合HPLC检测,可以知道你要的成分大概在什么部位。
phytochemistryandnaturalproducts
8楼2010-09-02 21:42:42
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zhaokan123

金虫 (正式写手)

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karl2100(金币+1):谢谢提供! 2010-09-03 01:52:57
提供一个经验数据给你供参考,TLC条件中洗脱性高的溶剂在柱层析时多用两倍。
如:TLC【DCM:MeOH=8:1】,柱16:1
自助者天助
9楼2010-09-02 21:42:51
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zhaokan123

金虫 (正式写手)

打错了,洗脱性低的溶剂在过柱时多用两倍。。。
自助者天助
10楼2010-09-02 21:43:33
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