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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白表达-请大家帮忙分析-3ks
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白表达-请大家帮忙分析-3ks 已有2人参与

大家好！

我构建表达体系pet22b-BL21（+）DE3，就拿做37℃、1mM IPTG诱导6h来举例，有时候能表达出蛋白，有时候不能，请大家帮忙分析原因何在（除了TB培养基配置的问题），感谢！

祝大家天天快乐！
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1楼 2010-08-31 15:26:10
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
接菌量不同的话可能会出现这总情况，另外是不是表达时间太长，降解了。建议分时段取样检查。
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金币是赌出来的
2楼2010-08-31 17:08:50
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-08-31 17:52:54
BL21宿主的表达载体，长时间放置的话容易出现这种情况，建议提取质粒，重新转一下宿主。如果不是这个原因，IPTG没问题的话，很可能就是操作的问题，比如忘记加IPTG等等
赞一下(2人) 回复此楼
天道酬勤
3楼2010-08-31 17:16:28
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