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【讨论】做HPLC时碰到的问题
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sean_zhang
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专业: 中药化学
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【讨论】做HPLC时碰到的问题
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走液相的时候,走梯度从0-50min,甲醇从5%-100%,当走到100%的时候,基线就飘上去不下来了,是为什么咧?
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1楼
2010-08-31 09:52:15
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bokai84
禁虫
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4楼
2010-08-31 10:54:08
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qcsgx
铜虫
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专业: 药学
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小木虫(金币
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梯度洗脱随着有机相的增大,会将流动相中有机杂质洗脱出来产生空白峰;如果水相不是用超纯水(包括缓冲盐不是用色谱纯),有机相不是用进口的,则系统空白峰会很多、很大、很杂,影响样品分析结果。特别紫外检测波长较低时(如190-210nm左右),空白峰干扰很明显,且基线漂移也很大。因此,建议流动相尽可能使用超纯水(如Millipore),有机相用进口的,试剂用色谱纯或高纯,这些对梯度分析较好,更会延长色谱柱的使用寿命。
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2010-08-31 10:01:29
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luomuwuhen
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注册: 2009-05-14
性别: GG
专业: 有机合成
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小木虫(金币
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走梯度就这样,基线不平很正常,楼主可以走两次空白梯度,如果两次一致,就可以了,不影响分离度就可以了
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药物合成
3楼
2010-08-31 10:07:33
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sean_zhang
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专业: 中药化学
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Originally posted by
luomuwuhen
at 2010-08-31 10:07:33:
走梯度就这样,基线不平很正常,楼主可以走两次空白梯度,如果两次一致,就可以了,不影响分离度就可以了
基线飘上去了,真丑,额
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5楼
2010-08-31 11:04:14
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