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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sean_zhang

银虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】做HPLC时碰到的问题 已有7人参与

走液相的时候,走梯度从0-50min,甲醇从5%-100%,当走到100%的时候,基线就飘上去不下来了,是为什么咧?
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qcsgx

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
梯度洗脱随着有机相的增大,会将流动相中有机杂质洗脱出来产生空白峰;如果水相不是用超纯水(包括缓冲盐不是用色谱纯),有机相不是用进口的,则系统空白峰会很多、很大、很杂,影响样品分析结果。特别紫外检测波长较低时(如190-210nm左右),空白峰干扰很明显,且基线漂移也很大。因此,建议流动相尽可能使用超纯水(如Millipore),有机相用进口的,试剂用色谱纯或高纯,这些对梯度分析较好,更会延长色谱柱的使用寿命。
2楼2010-08-31 10:01:29
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
走梯度就这样,基线不平很正常,楼主可以走两次空白梯度,如果两次一致,就可以了,不影响分离度就可以了
药物合成
3楼2010-08-31 10:07:33
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bokai84

禁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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4楼2010-08-31 10:54:08
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sean_zhang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-08-31 10:07:33:
走梯度就这样,基线不平很正常,楼主可以走两次空白梯度,如果两次一致,就可以了,不影响分离度就可以了

基线飘上去了,真丑,额
5楼2010-08-31 11:04:14
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sean_zhang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by bokai84 at 2010-08-31 10:54:08:
可以延长洗脱时间试试吧

这个,怎么延长,从50分钟上去了,基线就不下来了,走了120分钟还是这样
6楼2010-08-31 11:04:52
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sean_zhang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qcsgx at 2010-08-31 10:01:29:
梯度洗脱随着有机相的增大,会将流动相中有机杂质洗脱出来产生空白峰;如果水相不是用超纯水(包括缓冲盐不是用色谱纯),有机相不是用进口的,则系统空白峰会很多、很大、很杂,影响样品分析结果。特别紫外检测波 ...

水是超纯水,有机相也是色谱的,不过不是进口的,话说基线飘与是否进口很大关系么?
7楼2010-08-31 11:05:45
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sean_zhang at 2010-08-31 11:04:14:

基线飘上去了,真丑,额

楼主可以把梯度的线性放的缓一些,比如100min内由5%升到100%,或者可以从50%50min内升到100%
药物合成
8楼2010-08-31 11:30:23
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hustyookie

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
走梯度的时候,水相和有机相的比例一直在变,无法达到平衡状态,基线上飘是必然的.
不过楼上说的对,线性缓一些可以让上飘小一些.
9楼2010-08-31 16:15:56
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sean_zhang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-08-31 11:30:23:

楼主可以把梯度的线性放的缓一些,比如100min内由5%升到100%,或者可以从50%50min内升到100%

谢谢,学习了!
10楼2010-08-31 17:23:25
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