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lilirong2009

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[交流] 【求助/交流】DNase I酶切实验

跑了个大肠杆菌和金黄色葡萄球菌基因组DNA，泳道3和4分别是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌用DNase I 处理后的电泳图；泳道6和7是肠杆菌基因组DNA；泳道8和9是金黄色葡萄球菌基因组DNA；请问各位高手为什么基因组DNA酶切后电泳图是这样的，酶切不够？大肠杆菌的基因组DNA怎么会跑出这样的条带？

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1楼 2010-08-23 19:58:51

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wallace974

木虫 (小有名气)

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lilirong2009(金币+1): 2010-08-27 19:34:58

1、lz太粗心了，做琼脂糖电泳都不加个Marker。
2、3,6,7泳道有蛋白或多糖污染，因而密度低，你加样的时候估计样品是飘起来了，有一部分并没有进入胶里，造成拖尾。
3、怀疑你的DNaseI有问题，4和8,9相比根本没有发生酶切，酶切后应该是弥散状，你换一个DNaseI试试，或者基因组浓度、酶切温度、酶切时间看看是不是和说明书上一致，特别是基因组浓度，从图片上看，你的基因组浓度很大。