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xieyin717

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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-08-30 21:19:31
间接ELISA方法在很多教科书上都有的,还有详细的溶液配方。你可以自己先检索然后不明白的地方发帖子问。
52187644
3楼2010-08-30 19:28:54
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jinjiniao8198

铜虫 (小有名气)

★ ★
silicare(金币+2):谢谢参与 2010-08-30 18:42:13
xieyin717(金币+5): 2010-08-31 16:06:06
你可以先采用包被原浓度为2μg/mL,按间接ELISA法测抗体效价。
其实验步骤如下:
(1)包被:将包被原用包被液稀释成2μg/mL,每孔100μL, 4℃包被过夜。
(2)洗涤:3次。(250μL)
(3)封闭:1%的OVA每孔250μL,37℃孵育2h。
(4)洗涤:3次(250μL)
(5)加入免疫血清:用PBS液将小鼠血清倍比稀释成不同浓度,(按照1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600,1:3200,…)每个浓度一排,同时设空白对照和阴性对照,每孔100μL,加完后,于37℃温箱孵育1h。
(6)洗涤:3次。(250μL)
(7)加酶标二抗(羊抗鼠-HRP):用PBS液将酶标二抗稀释成工作浓度(1:5000),加到96孔酶标板,每孔100μL,加完后,于37℃温箱孵育1h。
(8)洗涤:3次。(250μL)
(9)加底物:每孔100μL,加完后,于37℃温箱避光放置20min。(底物A:底物B=1:100)
(10)终止:每孔加2mol/L的H2SO450μL,用酶标仪测定OD450值。
2楼2010-08-30 17:01:39
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xieyin717

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4楼2010-08-31 16:21:07
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qiqilao

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们实验室做的跟一楼的是一样的
5楼2010-08-31 16:35:58
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