应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】贴壁细胞复苏死了
91/1返回列表
查看: 2003  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Annel

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】贴壁细胞复苏死了 已有5人参与

大家好，我最近遇到一个很棘手的问题，我买的贴壁细胞刚拿回来挺好的，传代了几次也都很好，后来冻存了一些，结果复苏的时候一瓶都不活，根本不贴壁，慢慢就死了。请问是哪里出问题了呢？我之前用的gibco的1640，后来没货了就用的hyclone的，请问这些培养基配置的时候除了加胎牛血清和双抗还要加别的吗？我以前养的别的细胞就是直接按比例配好就行了，细胞活的挺好的。是培养基的问题吗？请高手帮帮忙啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-15 10:28:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liushuai1122

木虫 (著名写手)

小虫虫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能冻存的时候出问题了
赞一下(1人) 回复此楼
慎独！！！
2楼2010-08-15 10:44:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by Annel at 2010-08-15 10:28:58:
大家好，我最近遇到一个很棘手的问题，我买的贴壁细胞刚拿回来挺好的，传代了几次也都很好，后来冻存了一些，结果复苏的时候一瓶都不活，根本不贴壁，慢慢就死了。请问是哪里出问题了呢？我之前用的gibco的1640， ...

DMSO（10%）加了没有？还有，是不是你细胞冻存的时候细胞量比较少啊。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-08-15 10:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-15 10:46:42:

DMSO（10%）加了没有？还有，是不是你细胞冻存的时候细胞量比较少啊。

你好，加了的，我以前冻存细胞也是这样冻的，复苏都能活的，冻存的时候，25ml的培养瓶，一瓶冻两支冻存管，复苏观察培养瓶里细胞挺多的，但就是不贴壁，请指教，谢谢啦
赞一下 回复此楼
4楼2010-08-15 10:53:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liushuai1122 at 2010-08-15 10:44:17:
可能冻存的时候出问题了

冻存的是加了完全培养基和10%的DMSO的，以前也是这样冻存别的细胞的，都能活，就是现在，都复苏了好几次了，第一天还看到有挺多沉到瓶底的，第二天就基本都飘起来了
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-15 10:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你放到-80冻存还是液氮？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-08-15 10:58:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-15 10:58:06:
你放到-80冻存还是液氮？

-80℃冰箱的
回复此楼
7楼2010-08-15 11:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-08-15 12:39:37
引用回帖:
Originally posted by Annel at 2010-08-15 11:03:49:

-80℃冰箱的

可能是中途升温了吧……
-80不是放细胞的好地方，有些细胞很脆的，放-80很容易死掉
我就养过一两株细胞是这样的，液氮好好的，-80死得很难看
赞一下(3人) 回复此楼
8楼2010-08-15 11:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rabbit9355

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
细胞培养瓶的问题？或者冻存前后胎牛血清批次不一样？胎牛血清对细胞生长影响也很大的。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-08-17 19:56:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Annel 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭