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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞状态莫名其妙，着急啊，在线等
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guojing0000

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞状态莫名其妙，着急啊，在线等 已有10人参与

本人一直在做肝细胞实验，就是HL-7702那个品种，之前一直是好好的，养的很顺利，也做了挺多实验的，并且冻存了20多支。但是突然有一天，让别人帮忙换了一次培养液，然后就很奇怪了，细胞染菌死了，于是我重新复苏，复苏成功了，但是只要我一分瓶就感染，瓶子什么都是新的，离心管枪头也是刚刚灭过菌的，就是很奇怪的染菌，然后之后的细胞一直染菌，我已经非常注意了，但是还是染菌，往往是第一天好好地，第二天突然死掉，或者是分成2瓶，一瓶好好地，另外一瓶染菌死掉，特别奇怪，简直找不到原因。
前天又复苏了一只，这只倒是没有染菌，但是就是一直不贴壁，我郁闷死了，等着做实验，着急啊。
血清培养液超净台应该不存在问题，别人也在用，并且我原来也一直用这家的东西，没有出过问题，谁 想到实验做了半年多，麻烦来了。
请各位高手帮忙想想吧，我实验是很迷惑，并且很着急，先在此谢过大家了。
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1楼 2010-10-11 17:44:15
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playboy723

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-10-13 09:14:55
呵呵  未解之谜   你休息3天后重新复苏养细胞吧   这个现象谁也解释不了  唯一的解释是你最近比较背   呵呵   不过如果你的细胞能耐药的话最好还是加药筛几天吧  可能是你的细胞在冻的过程中污染了
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2楼2010-10-12 12:16:50
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guojing0000

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by playboy723 at 2010-10-12 12:16:50:
呵呵  未解之谜   你休息3天后重新复苏养细胞吧   这个现象谁也解释不了  唯一的解释是你最近比较背   呵呵   不过如果你的细胞能耐药的话最好还是加药筛几天吧  可能是你的细胞在冻的过程中污染了

您好，我想咨询一下我应该加一些什么药物来筛选细胞呢？
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3楼2010-10-12 14:50:10
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★ ★
silicare(金币+2):有时就这么简单 2010-10-18 12:08:11
培养箱染了吧。全部重新消毒一下。
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
4楼2010-10-12 15:08:45
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wshecheng

银虫 (正式写手)
培养箱的浓度有没有变化呀？
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5楼2010-10-12 15:15:27
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zhandeguo1

银虫 (小有名气)

污染的细胞

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-10-13 09:15:32
我曾经也遇到过一直复苏不好的。因为冻了几批同样的细胞，换一批复苏就没有问题了。所以你的20多支是一批冻的吗？如果是就很有可能是冻存是污染了。这样你的细胞就会在过一天或传代是出现污染了。
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6楼2010-10-12 15:33:07
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guojing0000

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhandeguo1 at 2010-10-12 15:33:07:
我曾经也遇到过一直复苏不好的。因为冻了几批同样的细胞，换一批复苏就没有问题了。所以你的20多支是一批冻的吗？如果是就很有可能是冻存是污染了。这样你的细胞就会在过一天或传代是出现污染了。

不是同一代冻存的，是好多代，并且我原来还复苏成功过，现在复苏同样的一代就染菌，唉，倒霉死了，还有别的问题存在的可能行吗？
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7楼2010-10-12 17:15:24
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guojing0000

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-10-12 15:08:45:
培养箱染了吧。全部重新消毒一下。

我把里面的全部洗了一下，然后有拿酒精擦过，还需要做什么来加强消毒效果吗？
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8楼2010-10-12 17:16:36
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woaiwyj

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
环境问题 好好把各个环节都考虑下
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9楼2010-10-12 18:00:35
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njhncn

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看看是否心买的血清、血清的灭活过程、或是培养基配置时间长。活着用用他人问题的培养基。
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10楼2010-10-12 18:06:26
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