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wanghr595

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】基因连上PMD-18T,结果PCR分子量不对 已有10人参与

基因应该是连上了的,结果挑菌落PCR分子量不对,目的基因1300,PCR条带只有900多,TaqPCR之后做了胶回收的,应该没有杂带的,实在是搞不懂啊!盼望哪位大侠帮忙,万分感谢了!
我酶切后的片段还是900左右,又挑了其他的一些菌落,结果还不行!搞不懂,应该很好连的啊,真的很愁人。

[ Last edited by wanghr595 on 2010-8-15 at 16:41 ]
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果不是使用simple可以提质粒做双酶切看看
3楼2010-08-13 00:42:07
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提质粒酶切的结果呢?
先测序吧,看看是怎么回事
2楼2010-08-12 22:22:21
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xiaoru2010


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wanghr595 at 2010-08-12 21:04:55:
基因应该是连上了的,结果挑菌落PCR分子量不对,目的基因1300,PCR条带只有900多,TaqPCR之后做了胶回收的,应该没有杂带的,实在是搞不懂啊!盼望哪位大侠帮忙,万分感谢了!

我的片段也是明明1300,让公司做的克隆测序,结果给我的片段只有870,能找到引物,但不是我要的片段……无语
4楼2010-08-13 09:13:53
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~!


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重新再做一遍了……
5楼2010-08-13 09:17:05
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