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lccc1995

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于DNA提取后测定OD值的问题 已有8人参与

我用试剂盒提取DNA之后,想测一下DNA的浓度和纯度。我看书上说要先将DNA溶液稀释再进行吸光度的测定,我想问一下,这是用纯水稀释还是用缓冲液稀释?还有,要是得到的OD260/OD280偏低,只是说明纯度不够吗?那还能继续做后续的工作吗?

刚接触这方面的东西,很多东西都不太懂,谢谢哈~
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得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

lccc1995(金币+2): 2010-08-12 16:13:33
用水还是Tris-buffer还是TE buffer洗脱得到的DNA呢?
不过其实稀释倍数很大(100倍以上)的话,用水测也行~如果担心有影响就用相应的buffer,个人经验,后面两种盐溶液用水做空白参比的话,测出来是负值
2楼2010-08-12 15:58:43
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lccc1995

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-12 15:58:43:
用水还是Tris-buffer还是TE buffer洗脱得到的DNA呢?
不过其实稀释倍数很大(100倍以上)的话,用水测也行~如果担心有影响就用相应的buffer,个人经验,后面两种盐溶液用水做空白参比的话,测出来是负值

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我用水稀释的,然后用水做的空白,得到的比值是1.5,没有在1.7-1.9之间。用水稀释会影响这个结果吗?还用高手,问问哈,要是得到的OD比是1.5,还能做后续的工作吗?我想做SNP来着~
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3楼2010-08-12 16:03:50
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


amisking(金币+1): 2010-08-12 19:56:09
引用回帖:
Originally posted by lccc1995 at 2010-08-12 16:03:50:

=============================================
我用水稀释的,然后用水做的空白,得到的比值是1.5,没有在1.7-1.9之间。用水稀释会影响这个结果吗?还用高手,问问哈,要是得到的OD比是1.5,还能做后续的工作 ...

不怕,绝对能做后续实验~PCR实验也没那么娇气
4楼2010-08-12 16:16:33
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lccc1995

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-12 16:16:33:


不怕,绝对能做后续实验~PCR实验也没那么娇气

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谢谢谢谢哈~
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐
5楼2010-08-12 16:20:32
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linysm

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用什么稀释,看你归零时候用的液体是什么了
6楼2010-08-29 11:25:52
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lstt09nk:交流贴请勿纯表~ 2010-09-10 15:45:46
7楼2010-09-08 20:39:10
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spirit-001

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你可以先跑个内标看看吧
8楼2010-09-10 11:07:53
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用什么做归零 用什么稀释dna   水和te都可以。
9楼2010-09-10 11:31:52
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Lee_Py

银虫 (小有名气)

一般情况 用水做空白对照  加水稀释50倍 取1微测od DNA的一般在1.8左右 太低或太高 就有可能是蛋白质或者RNA没除干净  建议做个纯化 不过 也看你接下来做什么了
10楼2010-09-10 15:43:32
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