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lccc1995

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于DNA提取后测定OD值的问题 已有8人参与

我用试剂盒提取DNA之后,想测一下DNA的浓度和纯度。我看书上说要先将DNA溶液稀释再进行吸光度的测定,我想问一下,这是用纯水稀释还是用缓冲液稀释?还有,要是得到的OD260/OD280偏低,只是说明纯度不够吗?那还能继续做后续的工作吗?

刚接触这方面的东西,很多东西都不太懂,谢谢哈~
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lccc1995

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-12 15:58:43:
用水还是Tris-buffer还是TE buffer洗脱得到的DNA呢?
不过其实稀释倍数很大(100倍以上)的话,用水测也行~如果担心有影响就用相应的buffer,个人经验,后面两种盐溶液用水做空白参比的话,测出来是负值

=============================================
我用水稀释的,然后用水做的空白,得到的比值是1.5,没有在1.7-1.9之间。用水稀释会影响这个结果吗?还用高手,问问哈,要是得到的OD比是1.5,还能做后续的工作吗?我想做SNP来着~
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐
3楼2010-08-12 16:03:50
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lccc1995

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-12 16:16:33:


不怕,绝对能做后续实验~PCR实验也没那么娇气

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谢谢谢谢哈~
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐
5楼2010-08-12 16:20:32
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lccc1995

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冬虫夏草1 at 2010-09-10 18:38:06:
我觉得应该用空白对照液稀释

哈哈,我打了电话问技术,他们说用什么溶解DNA的,就用什么做空白。用水的话,测出来的OD应该会小点儿,但是也没太大事
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐
12楼2010-09-10 20:21:54
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