| 查看: 1440 | 回复: 5 | |||
sqhnsd金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】反相HPLC分离蛋白质 已有3人参与
|
| 有没有做过RP-HPLC分离蛋白的？交流一下， 我最近做的比较郁闷，分离效果不好 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有286人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 实用高效液相色谱分析方法建立（中文版）.pdf
已经有47人回复
- 求助：关于辅料在HPLC中杂质峰很多，干扰多
已经有4人回复
- RP-HPLC分离蛋白质
已经有8人回复
- 【交流】HPLC相同条件下，为何我们检测不出主峰杂质？
已经有11人回复
- 【资源】经验：反相HPLC柱子的清洁和再生
已经有22人回复
- 【求助】RP-HPLC分离蛋白质样品遇到的奇怪现象
已经有13人回复
- 【资源】液相色谱常见问题及处理方法
已经有43人回复
- 【资源】高效液相色谱仪使用遇到的问题
已经有24人回复
2楼2010-08-13 12:54:33
sqhnsd
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 515.3
- 散金: 100
- 帖子: 412
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1045397
- 注册: 2010-06-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
|
你好，我的问题： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2285152&fpage=3 你可以看看我的图。 我的样品制备过程如下： 样品为大肠杆菌全蛋白，SDS-PAGE后按照分子量进行分离，后将不同分子量蛋白进行电洗脱，然后通过透析+丙酮沉淀去除盐和SDS，A、B图分离效果比较理想，分子量介于10-20 kDa组分，不同组分间上样量差别不大（2倍左右）。 可能的问题： 1.SDS没有除干净：这个不太可能，A、B分离还挺好，其他组分也都是同样的处理方式。 2.分子量大影响分离：C8柱子Pore size 300 A，之后换了pore size 为1000 A的（C含量介于C4 -C8）R2柱子，分离效果没有改善。 3. 流速：流速快可能影响传质效率，因此，在R2柱子上将流速降为0.5ml/min，其他条件不变，分离效果仍然没有改善。 所以，现在我不知道问题出在哪里，请高手指点。 |
3楼2010-08-13 13:18:04
sqhnsd
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 515.3
- 散金: 100
- 帖子: 412
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1045397
- 注册: 2010-06-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
|
你好，我的问题： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2285152&fpage=3 你可以看看我的图。 我的样品制备过程如下： 样品为大肠杆菌全蛋白，SDS-PAGE后按照分子量进行分离，后将不同分子量蛋白进行电洗脱，然后通过透析+丙酮沉淀去除盐和SDS，A、B图分离效果比较理想，分子量介于10-20 kDa组分，不同组分间上样量差别不大（2倍左右）。 可能的问题： 1.SDS没有除干净：这个不太可能，A、B分离还挺好，其他组分也都是同样的处理方式。 2.分子量大影响分离：C8柱子Pore size 300 A，之后换了pore size 为1000 A的（C含量介于C4 -C8）R2柱子，分离效果没有改善。 3. 流速：流速快可能影响传质效率，因此，在R2柱子上将流速降为0.5ml/min，其他条件不变，分离效果仍然没有改善。 所以，现在我不知道问题出在哪里，请高手指点。 |
4楼2010-08-13 13:18:58
5楼2010-08-13 14:12:31
sqhnsd
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 515.3
- 散金: 100
- 帖子: 412
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1045397
- 注册: 2010-06-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
6楼2010-08-13 15:15:52
20