| 查看: 1395 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
sqhnsd金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】反相HPLC分离蛋白质 已有3人参与
|
||
| 有没有做过RP-HPLC分离蛋白的？交流一下， 我最近做的比较郁闷，分离效果不好 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有238人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 实用高效液相色谱分析方法建立（中文版）.pdf
已经有47人回复
- 求助：关于辅料在HPLC中杂质峰很多，干扰多
已经有4人回复
- RP-HPLC分离蛋白质
已经有8人回复
- 【交流】HPLC相同条件下，为何我们检测不出主峰杂质？
已经有11人回复
- 【资源】经验：反相HPLC柱子的清洁和再生
已经有22人回复
- 【求助】RP-HPLC分离蛋白质样品遇到的奇怪现象
已经有13人回复
- 【资源】液相色谱常见问题及处理方法
已经有43人回复
- 【资源】高效液相色谱仪使用遇到的问题
已经有24人回复
5楼2010-08-13 14:12:31
2楼2010-08-13 12:54:33
sqhnsd
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 515.3
- 散金: 100
- 帖子: 412
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1045397
- 注册: 2010-06-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
|
你好，我的问题： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2285152&fpage=3 你可以看看我的图。 我的样品制备过程如下： 样品为大肠杆菌全蛋白，SDS-PAGE后按照分子量进行分离，后将不同分子量蛋白进行电洗脱，然后通过透析+丙酮沉淀去除盐和SDS，A、B图分离效果比较理想，分子量介于10-20 kDa组分，不同组分间上样量差别不大（2倍左右）。 可能的问题： 1.SDS没有除干净：这个不太可能，A、B分离还挺好，其他组分也都是同样的处理方式。 2.分子量大影响分离：C8柱子Pore size 300 A，之后换了pore size 为1000 A的（C含量介于C4 -C8）R2柱子，分离效果没有改善。 3. 流速：流速快可能影响传质效率，因此，在R2柱子上将流速降为0.5ml/min，其他条件不变，分离效果仍然没有改善。 所以，现在我不知道问题出在哪里，请高手指点。 |
3楼2010-08-13 13:18:04
sqhnsd
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 515.3
- 散金: 100
- 帖子: 412
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1045397
- 注册: 2010-06-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
|
你好，我的问题： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2285152&fpage=3 你可以看看我的图。 我的样品制备过程如下： 样品为大肠杆菌全蛋白，SDS-PAGE后按照分子量进行分离，后将不同分子量蛋白进行电洗脱，然后通过透析+丙酮沉淀去除盐和SDS，A、B图分离效果比较理想，分子量介于10-20 kDa组分，不同组分间上样量差别不大（2倍左右）。 可能的问题： 1.SDS没有除干净：这个不太可能，A、B分离还挺好，其他组分也都是同样的处理方式。 2.分子量大影响分离：C8柱子Pore size 300 A，之后换了pore size 为1000 A的（C含量介于C4 -C8）R2柱子，分离效果没有改善。 3. 流速：流速快可能影响传质效率，因此，在R2柱子上将流速降为0.5ml/min，其他条件不变，分离效果仍然没有改善。 所以，现在我不知道问题出在哪里，请高手指点。 |
4楼2010-08-13 13:18:58
