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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】毛细管电泳DNA峰拖尾
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】毛细管电泳DNA峰拖尾

请问大家在做毛细管电泳实验时有没有遇到下面问题，发现DNA出峰随着做实验次数的增加，其峰拖尾的越来越厉害，这是什么原因？是分离缓冲液时间用长了吗？
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1楼2010-08-10 16:14:33
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)
我使用的是激光诱导荧光检测，DNA的浓度只有2nM，应该不是浓度很高的原因，因为我用的内标以及DNA和蛋白生成的复合物的峰高和峰面积都很稳定，就是DNA越做到后面就拖尾的很厉害，因此峰面积会越来越多！
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3楼2010-08-11 15:52:22
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
zhangdapeng(金币+2):谢谢！ 2010-08-11 15:48:22
楼主用的什么检测器？如果是紫外，可能是您的DNA浓度过高了，需要把管子好好洗洗。
另外，不知道楼主用的是什么缓冲体系，有没有在体系中加点多羟基醇类化合物，如甘露醇等。
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七窍通了六窍
2楼2010-08-10 22:05:19
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
zhangdapeng(金币+1):谢谢！ 2010-08-12 10:08:38
好好洗洗管子再试试看。
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七窍通了六窍
4楼2010-08-12 01:24:29
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)
我每次进样前都用20mMNaOH冲洗2min，水冲洗1.5min，电泳缓冲液冲洗3min
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5楼2010-08-12 10:10:22
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