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hope0211

金虫 (小有名气)

[求助] 毛细管电泳自带样品不出峰

用的是河北永年的管。进标样只出溶剂峰,于是试着用了仪器自带的样品4-羟基乙酰苯和自带的20mM硼砂缓冲液,压力进样,还是不出峰,那个平啊···心都碎了。请大家帮忙分析一下原因,谢谢!

[ Last edited by hope0211 on 2011-6-6 at 19:38 ]
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zyzllover1

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hope0211(金币+2): 2011-06-08 21:33:59
你用的什么检测器?波长调节的是否对,还有检测器连接好了没?
2楼2011-06-07 09:06:10
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zyzllover1

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你用的什么检测器?波长调节的是否对,还有检测器连接好了没?
3楼2011-06-07 09:09:05
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

hope0211(金币+8): 2011-06-08 21:34:10
hope0211: 回帖置顶 2012-03-06 20:18:31
不出峰的原因很多,1.样品浓度是否太小 毛细管的内径很小,光程短,紫外检测灵明度低,建议样品浓度为1-10mM。2.检测窗口处的涂层是否除干净,毛细管外面的黄色涂层是不透紫外光的(可以用小刀刮掉或用打火机烧掉涂层)3.电压的方向 通常情况下,毛细管内壁带负电荷,施加电压的方向为正向(normal),如果管壁带正电荷,施加电压的方向为反向(reverse)4.压力进样的方向为向前(forword)。5.分离电压不要太小,否则出峰时间太长,通常设为15kV。6.检查检测器的表面是否干净。
4楼2011-06-07 09:14:48
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

hope0211(金币+3): 2011-06-08 21:34:20
看看电流正常不,其他同楼上
七窍通了六窍
5楼2011-06-07 21:09:45
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hope0211

金虫 (小有名气)

外面的涂层烧过了,用的反压,25KV,电流比较稳定。
6楼2011-06-08 21:35:28
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hope0211

金虫 (小有名气)

紫外检测器,254nm。1和10mM浓度的都进过了,都没有峰。
7楼2011-06-08 21:36:55
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

lz用的石英毛细管如果只是用酸和碱活化过,没有其他的特殊处理,管壁带负电荷,应该施加正向电压。
8楼2011-06-09 08:41:09
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hope0211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lee10yie at 2011-06-09 08:41:09:
lz用的石英毛细管如果只是用酸和碱活化过,没有其他的特殊处理,管壁带负电荷,应该施加正向电压。

我检测的就是阴离子呢,加入表面活性剂就是为了让电渗流改向,改向以后就应该施加负电压吧···
9楼2011-06-09 09:04:06
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hope0211

金虫 (小有名气)

发了好几个帖,弄混了···
嗯,是加的正电压。
10楼2011-06-09 09:05:36
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