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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】MTT实验中加MTT不显紫色
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Annel

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】MTT实验中加MTT不显紫色 已有13人参与

请问各位高手，我做神经细胞的MTT实验，加完药物和激活剂培养24小时观察，加药物和激活剂的细胞都完好，什么都没加的空白对照组细胞却死了，单独加药物不加激活剂的也死了，44小时后观察情况没变。吸掉药物加MTT，死细胞的那些孔里却看到了有紫色的晶状物，而活细胞的孔里一点紫色晶状物都没有，请高手指点这是什么原因呢？第一次做MTT，结果就这样，很焦虑啊
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1楼 2010-08-09 09:07:07
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梧桐如雪

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
死细胞也会染上一些MTT这倒是真的，怎么活细胞却一点没染上呢，真奇怪啊。难道你的细胞不产脱氢酶？还有，一个孔100ul 啊？看样子不是96孔板，是24孔板啊。同情下楼主，要不试试别的染色方法呗。比如最原始的结晶紫。
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17楼2010-08-13 15:16:01
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梧桐如雪

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的MTT哪里来的？有没有过期啊之类的？我用过三种，一种国内某公司，不详，需要挖最下面的粉末配，上面的不能用，凑活用用。一种生工的，不太好用。后来买了sigma，比较灵光。于是我们老板说：以后不要给我省钱！实验做出来才是硬道理！
一般96孔板里加20ul，每孔细胞数在10000个以下，就足够反应的了。4个小时就完全可以达到最佳的反应时间。你的过那几天才形成所谓的甲赞，肯定不准了。换个MTT，你要是上海的，我倒是可以偷偷给你一点（千万别有人认得我）……呵呵。
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19楼2010-08-13 16:12:39
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