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[交流]
【求助/交流】克隆Amp/Kan选择以及蓝白筛选 已有3人参与
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关于克隆有几个问题盼高人解答： 1.正常来说AMP和卡那霉素做平板都可以，但是我使用的克隆试剂盒上特别提到，a.如果是最大化转导；b.克隆大片段PCR产物（>1000bp）c.使用卡那霉素筛选；满足这三个条件就用regular protocol 如果是快速转导就用rapid protocol 当然我希望的是最大化转导，因为是做的是环境基因组，而且PCR产物也大于1kb。之前都是觉得用AMP是没有任何问题的，但是这里这样特别提醒是不是意味着我只能用卡那霉素筛选啊？ 2.蓝白斑筛选一般需要3个试剂：Amp、X-gal、IPTG，但是我的试剂盒上提到不要使用IPTG？这是什么道理。。。 |
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