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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】外源基因在大肠杆菌中表达的问题? 已有5人参与

外源基因在大肠杆菌中表达的时候是以可溶性蛋白的形式存在还是以包涵体的形式存在呢?还有我们做SDS-PAGE这时候的蛋白质是可溶的还是包涵体。
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黄大牛

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不一定吧,看情况啊
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼2010-07-28 18:26:50
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
直接收集菌体煮样肯定看不出来。
超声破碎,收集上清和沉淀,分别制样跑PAGE,和阴性对照比较,上清中有目的蛋白条带说明可溶,沉淀中出目的条带说明很可能就是包涵体了。
当然有时候也会出现部分可溶的情况。
Thank-you,so-blue.
3楼2010-07-28 20:33:53
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
同意3楼的解释。
4楼2010-07-28 21:14:26
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pb06319

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
三楼的方法好
5楼2010-07-28 21:27:31
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-07-28 20:33:53:
直接收集菌体煮样肯定看不出来。
超声破碎,收集上清和沉淀,分别制样跑PAGE,和阴性对照比较,上清中有目的蛋白条带说明可溶,沉淀中出目的条带说明很可能就是包涵体了。
当然有时候也会出现部分可溶的情况。

同意!
6楼2010-07-29 08:48:28
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