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【求助/交流】外源基因在大肠杆菌中表达的问题?
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黎亚丽
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[交流]
【求助/交流】外源基因在大肠杆菌中表达的问题?
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外源基因在大肠杆菌中表达的时候是以可溶性蛋白的形式存在还是以包涵体的形式存在呢?还有我们做SDS-PAGE这时候的蛋白质是可溶的还是包涵体。
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1楼
2010-07-28 17:45:24
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黄大牛
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
不一定吧,看情况啊
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朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼
2010-07-28 18:26:50
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susizheng
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
直接收集菌体煮样肯定看不出来。
超声破碎,收集上清和沉淀,分别制样跑PAGE,和阴性对照比较,上清中有目的蛋白条带说明可溶,沉淀中出目的条带说明很可能就是包涵体了。
当然有时候也会出现部分可溶的情况。
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Thank-you,so-blue.
3楼
2010-07-28 20:33:53
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sdqzsdqz
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专业: 肿瘤发生
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
同意3楼的解释。
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4楼
2010-07-28 21:14:26
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pb06319
木虫
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专业: 细胞周期与调控
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
三楼的方法好
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5楼
2010-07-28 21:27:31
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黎亚丽
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专业: 植物生理与生化
引用回帖:
Originally posted by
susizheng
at 2010-07-28 20:33:53:
直接收集菌体煮样肯定看不出来。
超声破碎,收集上清和沉淀,分别制样跑PAGE,和阴性对照比较,上清中有目的蛋白条带说明可溶,沉淀中出目的条带说明很可能就是包涵体了。
当然有时候也会出现部分可溶的情况。
同意!
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6楼
2010-07-29 08:48:28
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