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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 【求助】mPEG-mal,mPEG-COOH
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助】mPEG-mal,mPEG-COOH 已有5人参与

mPEG-mal,mPEG-COOH
两者都可以与带有赖氨酸的小肽偶合吗？
还是直接与小肽的NH2末端偶联的？
非常感谢！
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1楼 2010-07-19 18:40:36
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
如果mPEG-COOH可以的话，为什么看到的都是用mPEG-mal，用mPEG-mal还挺麻烦的，还牵到其它一些反应。

[ Last edited by americanyk on 2010-7-20 at 10:46 ]
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2楼2010-07-19 18:47:16
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薰衣草儿

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americanyk(金币+3):Null person 2010-07-19 13:04:53
偶来回答一下吧：

mPEG-mal通常是通过链接蛋白或药物中的巯基，达到PEG衍生化的目的，mPEG-COOH是通过与氨基酸或蛋白中的氨基键合，达到PEG衍生化的目的。
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3楼2010-07-19 18:54:32
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 薰衣草儿 at 2010-07-19 18:54:32:
偶来回答一下吧：

mPEG-mal通常是通过链接蛋白或药物中的巯基，达到PEG衍生化的目的，mPEG-COOH是通过与氨基酸或蛋白中的氨基键合，达到PEG衍生化的目的。[/si ...

在某些短肽中没有巯基，如果还是拿mPEG-mal来反应，需要先用SPDP等相关反应引入巯基，然而许多设计就是这样进行的！
用mPEG-COOH岂不是简单，是不是考虑释放方面的问题，还是怎么着？还是它反应太强，破坏了短肽！
谢谢小妹妹的指点！
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4楼2010-07-19 19:30:03
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薰衣草儿

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★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论~ 2010-07-20 08:26:44
蜗牛VS蜗牛(金币+5):charming girl 2010-07-20 10:54:34
mPEG-mal亚胺本身就不稳定，容易水解失活吧，但是mPEG-COOH由于是酸性，可能应用上比较受限制了，我觉得是~~mPEG-COOH链接蛋白或氨基酸的确比较简单的，但也需要EDC等中介活化才能保证链接效率，好了，偶的余热就到这里吧~还有不懂问本版专家qingbo，他很厉害的~
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5楼2010-07-19 20:27:10
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huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
蜗牛VS蜗牛(金币+3):在理，谢谢 2010-07-20 13:54:39
其实  我觉得 PEG-mal 主要是可以定位的结合到某些位置，有些研究可以在蛋白质表达过程中，在一些不影响蛋白质功能的地方引进巯基。这样PEG修饰的时候就可以特异性的结合到设计位置。也可以控制每个分子修饰的PEG数量。
而PEG-COOH，只要可以就会和氨基结合。不能特异性结合到某个氨基酸上，同时 同一个房子的PEG修饰的数目也不容易控制。
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海纳百川有容乃大；自强不息止于至善。
6楼2010-07-20 12:04:45
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qingbo62

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
蜗牛VS蜗牛(金币+10):谢谢 2010-07-20 17:41:53
楼上两位基本上都说了，那我再补充几点：

1、COOH与NH2的反应比Mal与SH的反应要慢的多，前者往往需要12-24小时以后，后者只需要1-3小时，就是Mal体系的一个优点。
  因此，前一个反应较慢。

2、COOH与NH2的反应需要催化剂，一般是用EDC或EDC+NHS(sulfo)，在用EDC活化以后，产生的中间体是一个酰基脲，这个结构容易参与亲核反应，比如NH2、SH、H2O都会与它反应，因为它的副反应比较多。另外，在于NH2反应后，另外一个副产物是脲。
  因此，这个反应副反应较多，且有副产物，可能需要除去。

3、因为很多蛋白或者多肽中都是同时含有COOH与NH2的，所以用EDC体系有可能会导致蛋白与多肽之间或者自身的反应。
另外，因为蛋白是有活性位点的，有些极端情况下会影响蛋白的活性。
  因此，很多人在合成多肽时会在末端加入一个（半）肽氨酸，或者在构建抗体序列时加入一段含SH的序列。

4、NH2变成SH。用SPDP的话，还有一步就是用DTT或者其他还原性物质把S-S键断裂反应SH，再与Mal反应，这样比较麻烦，而且还原物质或者除不彻底，会影响SH与Mal的反应。
可以尝试用iminothiolane，一步反应，比较方便。
另外，用SH与Mal的反应还有一个优点，就是比较容易跟踪反应进行的程度，好像是用DTNB。

以上就是二者的区别，但其实看文献的话，有非常多的人用COOH与NH2的反应接蛋白或者多肽，你可以试一下，只要反应效率还可以，有活性就可以继续往下做。
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7楼2010-07-20 15:35:37
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by qingbo62 at 2010-07-20 15:35:37:
楼上两位基本上都说了，那我再补充几点：

1、COOH与NH2的反应比Mal与SH的反应要慢的多，前者往往需要12-24小时以后，后者只需要1-3小时，就是Mal体系的一个优点。
  因此，前一个反应较慢。

2、COOH与NH2的 ...

太厉害了。
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8楼2010-07-20 17:42:18
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逍萍萍

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你知道mPEG-COOH是用什么方法做的吗
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9楼2014-07-26 16:54:12
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逍萍萍

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by qingbo62 at 2010-07-20 15:35:37
楼上两位基本上都说了，那我再补充几点：

1、COOH与NH2的反应比Mal与SH的反应要慢的多，前者往往需要12-24小时以后，后者只需要1-3小时，就是Mal体系的一个优点。
  因此，前一个反应较慢。

2、COOH与NH2的反 ...

请问你知道mPEG-COOH可以用什么方法合成吗
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10楼2014-07-26 16:55:30
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