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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助】mPEG-mal,mPEG-COOH 已有5人参与

mPEG-mal,mPEG-COOH
两者都可以与带有赖氨酸的小肽偶合吗?
还是直接与小肽的NH2末端偶联的?
非常感谢!
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qingbo62

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
蜗牛VS蜗牛(金币+10):谢谢 2010-07-20 17:41:53
楼上两位基本上都说了,那我再补充几点:

1、COOH与NH2的反应比Mal与SH的反应要慢的多,前者往往需要12-24小时以后,后者只需要1-3小时,就是Mal体系的一个优点。
  因此,前一个反应较慢。

2、COOH与NH2的反应需要催化剂,一般是用EDC或EDC+NHS(sulfo),在用EDC活化以后,产生的中间体是一个酰基脲,这个结构容易参与亲核反应,比如NH2、SH、H2O都会与它反应,因为它的副反应比较多。另外,在于NH2反应后,另外一个副产物是脲。
  因此,这个反应副反应较多,且有副产物,可能需要除去。

3、因为很多蛋白或者多肽中都是同时含有COOH与NH2的,所以用EDC体系有可能会导致蛋白与多肽之间或者自身的反应。
另外,因为蛋白是有活性位点的,有些极端情况下会影响蛋白的活性。
  因此,很多人在合成多肽时会在末端加入一个(半)肽氨酸,或者在构建抗体序列时加入一段含SH的序列。

4、NH2变成SH。用SPDP的话,还有一步就是用DTT或者其他还原性物质把S-S键断裂反应SH,再与Mal反应,这样比较麻烦,而且还原物质或者除不彻底,会影响SH与Mal的反应。
可以尝试用iminothiolane,一步反应,比较方便。
另外,用SH与Mal的反应还有一个优点,就是比较容易跟踪反应进行的程度,好像是用DTNB。

以上就是二者的区别,但其实看文献的话,有非常多的人用COOH与NH2的反应接蛋白或者多肽,你可以试一下,只要反应效率还可以,有活性就可以继续往下做。
7楼2010-07-20 15:35:37
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

如果mPEG-COOH可以的话,为什么看到的都是用mPEG-mal,用mPEG-mal还挺麻烦的,还牵到其它一些反应。

[ Last edited by americanyk on 2010-7-20 at 10:46 ]
2楼2010-07-19 18:47:16
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薰衣草儿

荣誉版主 (知名作家)

♡花语の恋♡

优秀版主

★ ★ ★
americanyk(金币+3):Null person 2010-07-19 13:04:53
偶来回答一下吧:

mPEG-mal通常是通过链接蛋白或药物中的巯基,达到PEG衍生化的目的,mPEG-COOH是通过与氨基酸或蛋白中的氨基键合,达到PEG衍生化的目的。
     .* ☆.☆° *. ☆ ☆‘‘ ☆。      ☆☆。  *° ‘‘☆ ☆°*‘‘°'☆
3楼2010-07-19 18:54:32
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 薰衣草儿 at 2010-07-19 18:54:32:
偶来回答一下吧:

mPEG-mal通常是通过链接蛋白或药物中的巯基,达到PEG衍生化的目的,mPEG-COOH是通过与氨基酸或蛋白中的氨基键合,达到PEG衍生化的目的。
[/si ...

在某些短肽中没有巯基,如果还是拿mPEG-mal来反应,需要先用SPDP等相关反应引入巯基,然而许多设计就是这样进行的!
用mPEG-COOH岂不是简单,是不是考虑释放方面的问题,还是怎么着?还是它反应太强,破坏了短肽!
谢谢小妹妹的指点!
4楼2010-07-19 19:30:03
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