24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

应助: 1 (幼儿园)
贵宾: 0.001
金币: 294.7
散金: 1794
红花: 19
帖子: 1235
在线: 680.8小时
虫号: 717067
注册: 2009-03-07
性别: MM
专业: 细胞生物学

[交流] 【求助】mPEG-mal,mPEG-COOH已有5人参与

mPEG-mal,mPEG-COOH
两者都可以与带有赖氨酸的小肽偶合吗？
还是直接与小肽的NH2末端偶联的？
非常感谢！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼2010-07-19 18:40:36

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

qingbo62

木虫 (正式写手)

BM-EPI: 1
应助: 9 (幼儿园)
金币: 2207.7
散金: 43
红花: 5
帖子: 371
在线: 61.3小时
虫号: 828137
注册: 2009-08-14
专业: 高分子合成化学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
蜗牛VS蜗牛(金币+10):谢谢 2010-07-20 17:41:53

楼上两位基本上都说了，那我再补充几点：

1、COOH与NH2的反应比Mal与SH的反应要慢的多，前者往往需要12-24小时以后，后者只需要1-3小时，就是Mal体系的一个优点。
  因此，前一个反应较慢。

2、COOH与NH2的反应需要催化剂，一般是用EDC或EDC+NHS(sulfo)，在用EDC活化以后，产生的中间体是一个酰基脲，这个结构容易参与亲核反应，比如NH2、SH、H2O都会与它反应，因为它的副反应比较多。另外，在于NH2反应后，另外一个副产物是脲。
  因此，这个反应副反应较多，且有副产物，可能需要除去。

3、因为很多蛋白或者多肽中都是同时含有COOH与NH2的，所以用EDC体系有可能会导致蛋白与多肽之间或者自身的反应。
另外，因为蛋白是有活性位点的，有些极端情况下会影响蛋白的活性。
  因此，很多人在合成多肽时会在末端加入一个（半）肽氨酸，或者在构建抗体序列时加入一段含SH的序列。

4、NH2变成SH。用SPDP的话，还有一步就是用DTT或者其他还原性物质把S-S键断裂反应SH，再与Mal反应，这样比较麻烦，而且还原物质或者除不彻底，会影响SH与Mal的反应。
可以尝试用iminothiolane，一步反应，比较方便。
另外，用SH与Mal的反应还有一个优点，就是比较容易跟踪反应进行的程度，好像是用DTNB。

以上就是二者的区别，但其实看文献的话，有非常多的人用COOH与NH2的反应接蛋白或者多肽，你可以试一下，只要反应效率还可以，有活性就可以继续往下做。