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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】影响酶切的因素? 已有14人参与

我今天提质粒后电泳图中有RNA,后续我要对这个质粒进行酶切,其中的RNA 对影响酶切效果吗?还有我想知道影响酶切的因素有那些?
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-06-30 08:35:51
RNA有点没事,因为它很容易降解,但是觉得多了还是不好的。
酶切影响很多,但是一般考虑多的就是酶切量和酶切时间,质粒的质量等。。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-06-30 01:06:13
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
怎么能判定是RNA呢!
2楼2010-06-30 00:21:44
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风荻

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一点影响没有 ,放心且就是了。只要你的酶切体系没问题就OK了
4楼2010-06-30 09:31:23
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-30 09:36:45
基本上没影响,后续酶切的保温过程中RNA会降解,在后面纯化的过程中就除掉了

一般提完质粒要用RNase处理,然后再抽提一下。如果嫌麻烦的话,RNase直接加溶液I里就行
5楼2010-06-30 09:32:29
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