应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】有没有做动物细胞培养的朋友进来给给建议
121/2返回列表12下一页
查看: 2039  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chuchengliang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有没有做动物细胞培养的朋友进来给给建议 已有5人参与

CHO细胞培养的过程中出现的问题：
单克隆筛选出来的细胞，经过一段时间的摇瓶培养稳定后逐渐转到另一种培养基，

待原培养基几乎被替代后，调整细胞密度，培养到对数期，分成两份，一部分作生长曲线，另一部分作为备份
通过生长曲线反映出细胞的活力和密度都非常高

作为备份的细胞培养到对数期后重复上述操作，一部分备份，另一部分作生长曲线，结果发现，细胞的分裂减缓，密度达不到原来的高度
同样下面的一批的密度更低，活力维持的时间更短，测定培养基的代谢产物发现，细胞的糖耗降低，乳酸积累较高，pH低。

不知道是什么原因，希望有高人能给出指点，不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-28 15:02:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chuchengliang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-06-28 19:40:58:
还是应该从细胞状态考虑的，看你的描述是细胞活力不好。

能说具体点吗？细胞的活力还是满好的，能够维持好几天，但就是对数期维持不长，细胞增殖很慢
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-06-29 10:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dannel025

铁杆木虫 (正式写手)
“糖耗降低，乳酸积累较高”，明显说明细胞的代谢发生了变化，乳酸比生成速率对葡萄糖比消耗速率的比值在相同条件下应该是基本不变的。
如果培养基是同一批次的话，从你的描述看不出更多的问题，我的推测是每次传代后的密度可能不同，从而产生了影响。较高或较低的接种密度都有影响细胞生长的实例，我有切身体会。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-06-29 12:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
培养基成分要慢慢改变，就像人去不同的环境，总要有个适应的过程。
赞一下(2人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
2楼2010-06-28 15:04:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qsx04152006

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能因素比较多，如：培养基成分、PH等
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-06-28 16:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还是应该从细胞状态考虑的，看你的描述是细胞活力不好。
赞一下(1人) 回复此楼
52187644
4楼2010-06-28 19:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chuchengliang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-06-28 15:04:25:
培养基成分要慢慢改变，就像人去不同的环境，总要有个适应的过程。

你说的对，我市慢慢改变的，但是现在是在新的培养基中开始能长好的
但是当传代了以后就不行了
赞一下 回复此楼
5楼2010-06-29 10:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chuchengliang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qsx04152006 at 2010-06-28 16:07:00:
可能因素比较多，如：培养基成分、PH等

但是为什么开始又能长好呢？
一批培养基，同样的生长条件，仅仅传代了一次就不行了
赞一下 回复此楼
7楼2010-06-29 10:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chuchengliang at 2010-06-29 10:14:22:

能说具体点吗？细胞的活力还是满好的，能够维持好几天，但就是对数期维持不长，细胞增殖很慢

至于是哪个试剂导致的出现这种情况还是需要你自己寻找原因的。但是从描述上我只能判断后来培养的细胞增殖慢了。显然就导致了生长曲线中对数期变短。另外耗糖量增加但是酸变多，说明细胞只是“吃没有长个”。你说的活力好只是肉眼判断的，至于细胞内代谢你只能用指标说明，指标的结果现在他的活力并不好。
我建议你可以测下不同密度下接种看是不是还是如此现象？另外培养基一定要保证都是一样的新鲜。有些细胞是比较“挑食”的。
赞一下(1人) 回复此楼
52187644
8楼2010-06-29 10:46:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qsx04152006

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以测一下生产状态较好的时候细胞密度、PH，然后逐渐分梯度来确定合理的传代参数，细胞培养本身涉及的因素很多，需要一个一个条件摸索
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-06-29 12:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chuchengliang 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 08食品或轻工求调剂，本科发表3篇sci一区top论文，一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵， 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭