24小时热门版块排行榜    

查看: 2060  |  回复: 11

chuchengliang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有没有做动物细胞培养的朋友进来给给建议 已有5人参与

CHO细胞培养的过程中出现的问题:
单克隆筛选出来的细胞,经过一段时间的摇瓶培养稳定后逐渐转到另一种培养基,

待原培养基几乎被替代后,调整细胞密度,培养到对数期,分成两份,一部分作生长曲线,另一部分作为备份
通过生长曲线反映出细胞的活力和密度都非常高

作为备份的细胞培养到对数期后重复上述操作,一部分备份,另一部分作生长曲线,结果发现,细胞的分裂减缓,密度达不到原来的高度
同样下面的一批的密度更低,活力维持的时间更短,测定培养基的代谢产物发现,细胞的糖耗降低,乳酸积累较高,pH低。

不知道是什么原因,希望有高人能给出指点,不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chuchengliang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-06-28 19:40:58:
还是应该从细胞状态考虑的,看你的描述是细胞活力不好。

能说具体点吗?细胞的活力还是满好的,能够维持好几天,但就是对数期维持不长,细胞增殖很慢
6楼2010-06-29 10:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dannel025

铁杆木虫 (正式写手)

“糖耗降低,乳酸积累较高”,明显说明细胞的代谢发生了变化,乳酸比生成速率对葡萄糖比消耗速率的比值在相同条件下应该是基本不变的。
如果培养基是同一批次的话,从你的描述看不出更多的问题,我的推测是每次传代后的密度可能不同,从而产生了影响。较高或较低的接种密度都有影响细胞生长的实例,我有切身体会。
10楼2010-06-29 12:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
培养基成分要慢慢改变,就像人去不同的环境,总要有个适应的过程。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-06-28 15:04:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qsx04152006

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能因素比较多,如:培养基成分、PH等
3楼2010-06-28 16:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是应该从细胞状态考虑的,看你的描述是细胞活力不好。
52187644
4楼2010-06-28 19:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chuchengliang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-06-28 15:04:25:
培养基成分要慢慢改变,就像人去不同的环境,总要有个适应的过程。

你说的对,我市慢慢改变的,但是现在是在新的培养基中开始能长好的
但是当传代了以后就不行了
5楼2010-06-29 10:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chuchengliang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qsx04152006 at 2010-06-28 16:07:00:
可能因素比较多,如:培养基成分、PH等

但是为什么开始又能长好呢?
一批培养基,同样的生长条件,仅仅传代了一次就不行了
7楼2010-06-29 10:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chuchengliang at 2010-06-29 10:14:22:

能说具体点吗?细胞的活力还是满好的,能够维持好几天,但就是对数期维持不长,细胞增殖很慢

至于是哪个试剂导致的出现这种情况还是需要你自己寻找原因的。但是从描述上我只能判断后来培养的细胞增殖慢了。显然就导致了生长曲线中对数期变短。另外耗糖量增加但是酸变多,说明细胞只是“吃没有长个”。你说的活力好只是肉眼判断的,至于细胞内代谢你只能用指标说明,指标的结果现在他的活力并不好。
我建议你可以测下不同密度下接种看是不是还是如此现象?另外培养基一定要保证都是一样的新鲜。有些细胞是比较“挑食”的。
52187644
8楼2010-06-29 10:46:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qsx04152006

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以测一下生产状态较好的时候细胞密度、PH,然后逐渐分梯度来确定合理的传代参数,细胞培养本身涉及的因素很多,需要一个一个条件摸索
9楼2010-06-29 12:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chuchengliang 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 307求调剂 +8 冷笙123 2026-03-17 8/400 2026-03-19 19:38 by maocaozhuxi
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 10/500 2026-03-19 15:08 by 阳阳哇塞
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 281求调剂(0805) +9 烟汐忆海 2026-03-16 19/950 2026-03-19 11:42 by laoshidan
[教师之家] 焦虑 +9 水冰月月野兔 2026-03-13 13/650 2026-03-19 09:50 by otani
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
信息提示
请填处理意见