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chuchengliang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有没有做动物细胞培养的朋友进来给给建议 已有5人参与

CHO细胞培养的过程中出现的问题:
单克隆筛选出来的细胞,经过一段时间的摇瓶培养稳定后逐渐转到另一种培养基,

待原培养基几乎被替代后,调整细胞密度,培养到对数期,分成两份,一部分作生长曲线,另一部分作为备份
通过生长曲线反映出细胞的活力和密度都非常高

作为备份的细胞培养到对数期后重复上述操作,一部分备份,另一部分作生长曲线,结果发现,细胞的分裂减缓,密度达不到原来的高度
同样下面的一批的密度更低,活力维持的时间更短,测定培养基的代谢产物发现,细胞的糖耗降低,乳酸积累较高,pH低。

不知道是什么原因,希望有高人能给出指点,不胜感激。
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chuchengliang at 2010-06-29 10:14:22:

能说具体点吗?细胞的活力还是满好的,能够维持好几天,但就是对数期维持不长,细胞增殖很慢

至于是哪个试剂导致的出现这种情况还是需要你自己寻找原因的。但是从描述上我只能判断后来培养的细胞增殖慢了。显然就导致了生长曲线中对数期变短。另外耗糖量增加但是酸变多,说明细胞只是“吃没有长个”。你说的活力好只是肉眼判断的,至于细胞内代谢你只能用指标说明,指标的结果现在他的活力并不好。
我建议你可以测下不同密度下接种看是不是还是如此现象?另外培养基一定要保证都是一样的新鲜。有些细胞是比较“挑食”的。
52187644
8楼2010-06-29 10:46:37
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
培养基成分要慢慢改变,就像人去不同的环境,总要有个适应的过程。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-06-28 15:04:25
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qsx04152006

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能因素比较多,如:培养基成分、PH等
3楼2010-06-28 16:07:00
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是应该从细胞状态考虑的,看你的描述是细胞活力不好。
52187644
4楼2010-06-28 19:40:58
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