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chuchengliang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有没有做动物细胞培养的朋友进来给给建议 已有5人参与

CHO细胞培养的过程中出现的问题:
单克隆筛选出来的细胞,经过一段时间的摇瓶培养稳定后逐渐转到另一种培养基,

待原培养基几乎被替代后,调整细胞密度,培养到对数期,分成两份,一部分作生长曲线,另一部分作为备份
通过生长曲线反映出细胞的活力和密度都非常高

作为备份的细胞培养到对数期后重复上述操作,一部分备份,另一部分作生长曲线,结果发现,细胞的分裂减缓,密度达不到原来的高度
同样下面的一批的密度更低,活力维持的时间更短,测定培养基的代谢产物发现,细胞的糖耗降低,乳酸积累较高,pH低。

不知道是什么原因,希望有高人能给出指点,不胜感激。
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dannel025

铁杆木虫 (正式写手)

“糖耗降低,乳酸积累较高”,明显说明细胞的代谢发生了变化,乳酸比生成速率对葡萄糖比消耗速率的比值在相同条件下应该是基本不变的。
如果培养基是同一批次的话,从你的描述看不出更多的问题,我的推测是每次传代后的密度可能不同,从而产生了影响。较高或较低的接种密度都有影响细胞生长的实例,我有切身体会。
10楼2010-06-29 12:31:20
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
培养基成分要慢慢改变,就像人去不同的环境,总要有个适应的过程。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-06-28 15:04:25
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qsx04152006

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能因素比较多,如:培养基成分、PH等
3楼2010-06-28 16:07:00
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是应该从细胞状态考虑的,看你的描述是细胞活力不好。
52187644
4楼2010-06-28 19:40:58
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