24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1255  |  回复: 3

felis

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教各位一个定量PCR引物设计的问题,谢谢啦 已有3人参与

我想通过定量PCR分析几个基因表达的差异,请问我应该根据mRNA序列设计引物还是cDNA序列呢?我感觉应该是cDNA。如果以mRNA序列设计,有什么区别呢?问题比较初级,请不吝赐教,谢谢哈
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
felis(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-21 18:52:03
有什么区别呢?
现在所谓的gDNA、cDNA、mRNA序列不都指的编码链么?


两条引物各能与一条链结合并引发合成,即使mRNA和cDNA序列是互补的,第一个循环结束后都会形成双链DNA,之后的循环就是正常的PCR一变二,二变四的过程了

不用操心正义反义链的问题

[ Last edited by ben1147 on 2010-6-21 at 18:51 ]
2楼2010-06-21 18:41:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

felis

木虫 (正式写手)

补充一下,实验中所用模板是RNA反转后的cDNA
3楼2010-06-21 18:46:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ymzfeng

金虫 (小有名气)


felis(金币+1):谢谢参与
做定量PCR检测一般比较灵敏的
所检测基因长度不用很大吧
在CDS区域设计比较好些吧
mRNA中有内含子,cDNA中有非编码序列的
4楼2010-06-21 20:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 felis 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 山东省基金2026 +3 jerry681 2026-04-08 3/150 2026-04-10 13:59 by 过客卡卡
[考研] 296求调剂 +12 汪!?! 2026-04-08 13/650 2026-04-10 12:09 by 汪!?!
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +6 你让我怎么荔枝 2026-04-10 7/350 2026-04-10 10:18 by 314126402
[考研] 调剂 +19 不逢春 2026-04-05 20/1000 2026-04-10 10:15 by may_新宇
[考研] 292求调剂 +9 笑笑袁 2026-04-09 9/450 2026-04-10 10:05 by LHGeng
[考研] +6 化工专硕323分 2026-04-04 6/300 2026-04-10 10:04 by may_新宇
[考研] 调剂 +15 小张ZA 2026-04-10 16/800 2026-04-10 09:56 by 690616278
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-05 11/550 2026-04-10 09:32 by 钟洲2011
[考研] 267求调剂 +5 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 5/250 2026-04-09 18:47 by stone_128
[考研] 一志愿武理车辆 281 求调剂 +5 上岸研究生. 2026-04-07 5/250 2026-04-09 15:56 by only周
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +5 Ytyt11 2026-04-09 6/300 2026-04-09 14:40 by Ytyt11
[考研] 求助071001调剂!!! +7 黄守松 2026-04-05 8/400 2026-04-09 09:07 by 徐良白眉大侠
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 259求调剂 +5 就爱吃土豆呀呀 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:40 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 304求调剂 +4 luoye0105 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:05 by 木子君1218
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 调剂 一志愿吉林大学357分 +5 .Starry. 2026-04-04 5/250 2026-04-06 09:28 by cql1109
[考研] 一志愿沪9,求生物学调剂,326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见