[交流] 【求助/交流】关于基因敲除已有5人参与

Originally posted by 临风7071 at 2010-06-10 10:05:44:
做酶切验证，那是最准确的方法。另外，你PCR时应该做阳性对照，以验证是否是PCR的问题

Originally posted by 鹏飞九万里 at 2010-06-10 12:25:31:
你的pcr片段大小是不是和你要敲除的基因片段大小差不多？

Originally posted by 鹏飞九万里 at 2010-10-19 10:30:45:
lz问题解决了没？我也遇到这样的问题了。。。

Originally posted by kaoyan1230 at 2010-10-19 16:06:27:
具体的比对一下你的基因片段大小和PCR产物的大小是否差不多吧，有的时候大小差别很少的。
也可以在你PCR产物的中间设计一个引物，这样做PCR的话，只有阳性的菌落才能P出来。

Originally posted by 寂寞之巅 at 2010-10-20 09:32:28:
有假阳性克隆 有可能你的PCR产物里面混有质粒，不知道你是不是用质粒做模板来P基因的

楼: Originally posted by 寂寞之巅 at 2010-10-24 10:29:14:
DpnI 是一种酶，作用于甲基化位点  去除质粒模板