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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于基因敲除已有5人参与

最近在做大肠基因敲除,转化的是PCR产物,是DNA片段,2000Kb多点,转化后,平板上有菌落长出来,接摇瓶转化子也长,同样的抗生素浓度下转化前的菌株不长,这可以说明转化子表现抗性吧?但是验证PCR时,P出来的条带总是在一条线上,也就是说没有重组上,感觉很奇怪,不知道各位有没有遇到这种情况,这到底是什么原因,转化进去片段应该不会表达的吧?不知道我有没有把问题说清楚,请高手指教!!先谢过了!!
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上班族,学习ing……
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临风7071

木虫 (正式写手)

dhmdddd(金币+1):谢谢!酶切试试看! 2010-06-10 12:03:59
做酶切验证,那是最准确的方法。另外,你PCR时应该做阳性对照,以验证是否是PCR的问题
3楼2010-06-10 10:05:44
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