24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2772  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于基因敲除已有5人参与

最近在做大肠基因敲除,转化的是PCR产物,是DNA片段,2000Kb多点,转化后,平板上有菌落长出来,接摇瓶转化子也长,同样的抗生素浓度下转化前的菌株不长,这可以说明转化子表现抗性吧?但是验证PCR时,P出来的条带总是在一条线上,也就是说没有重组上,感觉很奇怪,不知道各位有没有遇到这种情况,这到底是什么原因,转化进去片段应该不会表达的吧?不知道我有没有把问题说清楚,请高手指教!!先谢过了!!
回复此楼
上班族,学习ing……
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaoyan1230

金虫 (小有名气)

dhmdddd(金币+1):谢谢! 2010-10-20 08:37:29
具体的比对一下你的基因片段大小和PCR产物的大小是否差不多吧,有的时候大小差别很少的。
也可以在你PCR产物的中间设计一个引物,这样做PCR的话,只有阳性的菌落才能P出来。
8楼2010-10-19 16:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaoyan1230

金虫 (小有名气)

另外,挑取菌落做验证的时候,注意挑取单个菌落
9楼2010-10-19 16:06:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dhmdddd 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见