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新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】请教大家关于dna提取的问题已有12人参与

我提的是植物基因组dna，用过ctab法和试剂盒，但效果都不理想，具体问题是
提取出的dna用1倍TE溶解后，会出现絮状沉淀，可以确定不是dna，因为放置两三天后还是有，dna经紫外分光光度计检测正常，但琼脂糖检测结果很不好，有拖尾。

我想请教大家这是什么原因，是dna降解还是有糖酚类杂质？如果是杂质该怎么去除？（我用的ctab法抽提两遍）

附上dna琼脂糖图片

都是用试剂盒提的

[ Last edited by 换换 on 2010-6-8 at 17:43 ]

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1楼 2010-06-08 16:10:27

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2楼2010-06-08 16:12:11

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★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-06-09 06:24:17

引用回帖:

Originally posted by dfl204 at 2010-06-08 16:20:25:
１.从带型上来看，你所提取的DNA都有降解的嫌疑；
不知道你的上样量是多少，最好再少取一些稀释之后在点样看看，如果只有一条主带那就是没有降解的（蚕豆那个样品应该是不会有问题的）；
２.下面一块胶的样品不 ...

先谢谢大虾~~

1 有降解的话，那能做AFLP吗？比如第一张图，我操作还算严格啊，样品放-80度，加缓冲液前用液氮处理，从脱离冰箱到加入液氮时间很短，不超过2分钟。
但是有可能样品在送来实验室之前冻融过，不过也就一二次。

2我上样量4μl，dna2μl，蚕豆那个事对照，我做的不是蚕豆

3都是用试剂盒提的，跟用ctab法效果差不多

[ Last edited by 换换 on 2010-6-8 at 17:35 ]