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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 【求助/交流】western blot中，蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗，怎么还能和一抗结合？
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spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】western blot中，蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗，怎么还能和一抗结合？已有12人参与

western blot中，蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗？
天然构想被破坏了，特异性识别位点也被破坏了，怎么还能和一抗结合？
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1楼2010-06-01 20:24:44
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-02 17:47:33
spiderboy(金币+2):thanks 2010-06-04 11:22:16
并不是所用的抗原表位经WB后都能被抗体识别。若该表位为空间表位，经SDS，巯基乙醇等处理后，空间构象被破坏，此时抗体（一抗）不能识别。若为线性表位，则相反！
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10楼2010-06-02 08:32:57
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
前几天听了个讲座，说WB用的抗体在制备过程中就是以变性蛋白为靶标的。

。。。

不知道对不对，仅供参考！
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3楼2010-06-01 21:32:43
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郑B.CoA

金虫 (正式写手)
有一些一抗是抗特异氨基酸序列的。。好像叫线性表位。。。变性蛋白会失去三维构象，一抗是可以结合的

[ Last edited by 郑B.CoA on 2010-6-1 at 22:43 ]
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4楼2010-06-01 22:41:39
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piupme

铜虫 (小有名气)
抗体与抗原结合的力有好几种，你这时只加一种抗体进入就不会要求特异性了吧，自己感觉。。。
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5楼2010-06-01 23:15:41
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