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死掉的洋葱

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法 已有10人参与

我是第一次发帖,也没有金币可以贡献,不过希望大家帮帮忙,我用的是分光光度计来测定葡萄糖氧化酶的酶活,可是每次测定的值和实际值相差很多,大家看看还有没有其他的方法可以测定葡萄糖氧化酶的酶活!谢谢各位大侠了!
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zhmy26

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):很好的经验~~ 2010-05-29 21:27:13
我只能给出大概的建议,不保证一定正确啊。测定酶活性应该在底物过量的前提下,测定初始酶活,对吗?看到你所给出的体系中,有标准的0.2U/mL的葡萄糖氧化酶溶液,能否这样做?将这个0、2U/mL的葡萄糖氧化酶溶液再稀释2、4、8倍,根据你的方法获得分别稀释0、2、4、8倍的酶活单位,然后将这四个数字进行线性拟合。如果这四个数值拟合R2值在95%以上,你就可以大概认为这是一条标准曲线。然后按照你所说的偏差值进行一次换算即可,不必非要考虑酶活是否有问题了。不知道我讲清楚了没有?祝你好运。
9楼2010-05-29 20:07:34
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赵丽娟

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-29 21:31:02
你可以用滴定法试下,
2楼2010-05-26 11:09:13
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zhmy26

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
测定之前应该有一个标准曲线对吗?如果能够将标准曲线的R2值精确在99%以上,那么你就该相信你所做出来的结果。
3楼2010-05-26 15:45:27
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死掉的洋葱

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 赵丽娟 at 2010-05-26 11:09:13:
你可以用滴定法试下,

谢谢啊!这个方法我会试试看的!
您知道用酶标仪可以测定葡萄糖氧化酶的酶活吗?具体方法有谁可以告知!
4楼2010-05-26 15:49:51
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