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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电分析测试 » 用葡萄糖氧化酶做循环伏安法时候出不来峰值
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songwangpan

金虫 (小有名气)

[求助] 用葡萄糖氧化酶做循环伏安法时候出不来峰值

我在铁氰化钾溶液中用循环伏安法测试，可以出的来峰值

但是在电极上加入葡萄糖氧化酶后，在葡萄糖+PBS溶液中，用循环伏安法测试，

却出不了峰值

是因为酶失活还是因为别而原因呢，平时酶都是在4℃下保存，操作也基本没有在

室温下太久

PS.  之前如果把酶滴在材料上，酶会消失，现在的方法是把酶和材料混合在一起，

再滴入电极上
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1楼2011-05-25 10:00:48
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

songwangpan(金币+12): 你说的和我做的是一样的，那通氮气除氧的PBS里到底需不需要加上葡萄糖呀？ 2011-05-27 10:33:34
justinzhao(ECEPI+1): 奖励应助！呵呵 2011-05-27 11:48:35
同学  估计你是在打磨后的电极表面上修饰了纳米材料吧  这个时候  你应该把空白电极和修饰好了的电极在铁氰化钾溶液（最好选用铁氰化钾、亚铁氰化钾电对（5mM, 1:1）并以以0.1M KCl为支持电解质）中做CV扫描，如果你的修饰物为导电的，则修饰电极的电流应该比空白电极大，这只是证明纳米材料可以导电的。嗯，之后你可能是用滴涂法在电极表面滴涂GOD吧，假设你的GOD固定在了电极表面且没有失活  那么在通氮除氧的PBS中，在0.1V到-0.7V的电位窗口，能够在-0.4到-0.6V左右（SCE、Ag/AgCl）能够看到GOD的循环伏安峰。如果没有，那么你的GOD多半没有固定上去。失没失活，因为我没做过，就不好说了，请参照7楼那位同学的方法试试。此外，向PBS中通氧或者通氮的现象是不同的，请多看看文献吧。呵呵，恭祝实验顺利。
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9楼2011-05-26 20:39:45
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=虫虫=

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

内容已删除
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3楼2011-05-26 08:41:11
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xiao_lei12

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:48:00
在铁氰化钾溶液中用循环伏安法测试，出峰 ，只能说明你的电极没问题。
在电极上加入葡萄糖氧化酶后，在葡萄糖+PBS溶液中，用循环伏安法测试，你扫描的如果是正电位区，应该会有峰。这个峰是过氧化氢产生的。扫负电位区，需要除氧，这是酶在电极上的直接电化学。
判断是否是酶失活的方法，可以把电极电位设在+0.8V左右，用电流时间曲线法，试试加葡萄糖前后是否有电流的变化。
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7楼2011-05-26 10:39:23
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358733179

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

songwangpan(金币+8): 石墨烯，据文献说是可以实现直接电子转移的。 2011-05-26 12:16:52
你合成的材料能实现直接电子转移吗，如果能的话就应该有峰
如果不能，就必须加入电子介体才能有峰
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6楼2011-05-26 10:01:24
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=虫虫=

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:47:31
引用回帖:
Originally posted by songwangpan at 2011-05-26 09:23:34:
回帖就回帖，有必要把话说的这么难听吗？
我是刚开始做电化学，本来就不是很懂，只是参考文献这么做的，文献里就是用的PBS，但我写的是我用的PBS+glucose，如果不用这个，那请问要用什么？

我哪里说的难听？我是看不懂才加个问号，直接电化学本来就不好做，如果你做出来当然是恭喜你。如果确实是伤害了，抱歉是我多嘴，不好意思请见谅
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10楼2011-05-27 08:34:18
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:47:04
嗯  我觉得要分成两个实验做：1. 如果在通氮除氧的PBS中作出GOD的氧化还原峰了，建议你先做扫速与峰电流、峰电位的关系实验。这个实验完成后，就可以向PBS中加入葡萄糖，搅拌，然后停止，在不搅拌的条件下在相同的电位窗口下做循环伏安实验，看此时的还原峰电流或者氧化峰电流有没有变化（增大或者减小都可以，有变化就行。我在通氮除氧的PBS得到的结果是加入葡萄糖后，还原峰电流增大）。2. 如果你在空白PBS中没有得到一对明显的氧化还原峰，就不用再加入葡萄糖了，因为没有峰出现就说明GOD根本没上去，即使加入葡萄糖也应该没有响应。
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周少爷
16楼2011-05-27 11:14:14
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marco5533

银虫 (小有名气)
插上一句，我做的是酶电极，不过不是滴涂法！做酶传感器，有的时候CV图真的不好做出来，比如待测物浓度大了就测不出来了等等。后来我用ＤＰＶ做了，发现效果很好．但是翻阅文献，做酶的基本上都是用i-t曲线来做的，i-t曲线时间间隔短的话，就会呈现一个向下的弧线，而根本就不应该是呈阶梯状的曲线。上面有虫友说有可能是用 orgin平滑了，我觉得应该有点；但是主要还是他们把时间拉长了，比如时间间隔1min，或者5min，这样就可以做出阶梯状的曲线。
另外，电极捕捉h2o2是个相对缓慢的过程（相对与铁氰化钾探针分子来说），所以说做cv图的时候是不是得静止一段时间，不然数据会很不稳定的！
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23楼2011-06-02 10:35:11
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by wahds at 2011-06-01 21:47:06:
请教一下，你选择的还原电位是-0.57V，那是检测过氧化氢的还原电流吗？我看文献上过氧化氢的还原电流在+0.15V,你选择-0.57V是什么的还原电位呢？谢谢

嗯  请教不敢当 说实话 我也不清楚我在此点电位下检测的是啥物质的还原电流，我当时只是看到GOD的在此电位下出现了一个还原峰，加入葡萄糖后还原峰电流增大，所以在计时电流法中采用此电位为工作电位   后一个问题  我想问下您看到的是什么电极作为工作电极了  我所看个的几篇文献 因为是采用血红蛋白、辣根过氧化物酶、细胞色素c修饰物制备的  所以它的还原电位是在负电位区
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24楼2011-06-02 11:06:23
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逍遥杰001

木虫 (职业作家)
内容已删除
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27楼2011-06-02 14:35:12
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普通回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

葡萄糖氧化酶估计没有固定到电极上哦  你做DET的吧
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2楼2011-05-26 08:38:42
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songwangpan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lifucheng at 2011-05-26 08:38:42:
葡萄糖氧化酶估计没有固定到电极上哦  你做DET的吧

是的，是做DET的
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4楼2011-05-26 09:14:46
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songwangpan

金虫 (小有名气)
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5楼2011-05-26 09:23:34
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songwangpan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiao_lei12 at 2011-05-26 10:39:23:
在铁氰化钾溶液中用循环伏安法测试，出峰 ，只能说明你的电极没问题。
在电极上加入葡萄糖氧化酶后，在葡萄糖+PBS溶液中，用循环伏安法测试，你扫描的如果是正电位区，应该会有峰。这个峰是过氧化氢产生的。扫负 ...

我在glucose+PBS中测试之前，都有通氮气除氧，结果正负电位区都没有峰值出来，情况就是这样的。
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8楼2011-05-26 12:18:46
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