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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电分析测试 » 用葡萄糖氧化酶做循环伏安法时候出不来峰值
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

判断酶是否失活还可以用紫外检测下嘛。。。不过可能上去的酶量不够多。。。效果不明显。。。
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11楼2011-05-27 10:10:20
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:47:12
说句题外话。。。酶有电活性的同时是否一定有生物活性。。。应该打个问号。。。就像有时候我们能做出在负电位下的DET。。。但是假如葡萄糖后没有催化响应。。。还是得依靠加入介体在正电位下做。。。是否真的是DET。。。值得探讨。。。
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12楼2011-05-27 10:14:15
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songwangpan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 10:14:15:
说句题外话。。。酶有电活性的同时是否一定有生物活性。。。应该打个问号。。。就像有时候我们能做出在负电位下的DET。。。但是假如葡萄糖后没有催化响应。。。还是得依靠加入介体在正电位下做。。。是否真的是DE ...

不好意思，因为不清楚悬赏金币是一共20个，我以为是每人20，金币发完了，下次一定多送你点儿...
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13楼2011-05-27 10:38:43
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songwangpan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 10:14:15:
说句题外话。。。酶有电活性的同时是否一定有生物活性。。。应该打个问号。。。就像有时候我们能做出在负电位下的DET。。。但是假如葡萄糖后没有催化响应。。。还是得依靠加入介体在正电位下做。。。是否真的是DE ...

不好意思，因为不清楚悬赏金币是一共20个，我以为是每人20，金币发完了，下次一定多送你点儿...
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14楼2011-05-27 10:39:14
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songwangpan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiao_lei12 at 2011-05-26 10:39:23:
在铁氰化钾溶液中用循环伏安法测试，出峰 ，只能说明你的电极没问题。
在电极上加入葡萄糖氧化酶后，在葡萄糖+PBS溶液中，用循环伏安法测试，你扫描的如果是正电位区，应该会有峰。这个峰是过氧化氢产生的。扫负 ...

不好意思，因为不清楚悬赏金币是一共20个，我以为是每人20，金币发完了，下次一定多送你点儿...
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15楼2011-05-27 10:40:38
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:47:04
嗯  我觉得要分成两个实验做：1. 如果在通氮除氧的PBS中作出GOD的氧化还原峰了，建议你先做扫速与峰电流、峰电位的关系实验。这个实验完成后，就可以向PBS中加入葡萄糖，搅拌，然后停止，在不搅拌的条件下在相同的电位窗口下做循环伏安实验，看此时的还原峰电流或者氧化峰电流有没有变化（增大或者减小都可以，有变化就行。我在通氮除氧的PBS得到的结果是加入葡萄糖后，还原峰电流增大）。2. 如果你在空白PBS中没有得到一对明显的氧化还原峰，就不用再加入葡萄糖了，因为没有峰出现就说明GOD根本没上去，即使加入葡萄糖也应该没有响应。
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周少爷
16楼2011-05-27 11:14:14
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lifucheng at 2011-05-27 11:14:14:
嗯  我觉得要分成两个实验做：1. 如果在通氮除氧的PBS中作出GOD的氧化还原峰了，建议你先做扫速与峰电流、峰电位的关系实验。这个实验完成后，就可以向PBS中加入葡萄糖，搅拌，然后停止，在不搅拌的条件下在相同的 ...

你好，我看到很多文献都如你所说是加入葡萄糖后做CV看还原峰的减小，这个比较容易实现，但更直观的方法比如计时电流却不容易得到理想的阶梯状曲线，请教是何原因？谢谢！
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17楼2011-05-27 13:32:11
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 13:32:11:
你好，我看到很多文献都如你所说是加入葡萄糖后做CV看还原峰的减小，这个比较容易实现，但更直观的方法比如计时电流却不容易得到理想的阶梯状曲线，请教是何原因？谢谢！

嗯，请教不敢当，我就说说我的情况吧，其实我也没有做出葡萄糖氧化酶修饰电极的计时电流曲线，我当时选择的还原电位是-0.57V，做出的图反正很丑。后来想了下原因，可能与搅拌速度，通入氮气的量，加入的样品数量都有关系。搅拌子最好选用那种比较长，但不是很粗的搅拌子，搅拌速率稍微快点；氮气气泡也不能太多，我有次用那种快要空了的气瓶，减压阀显示只有一格，通入溶液中的气泡大概一到两秒钟一个吧，得到的I-T曲线相对较好；另外，用微量进样器进样的时候，加入的溶液不要太靠近工作电极，不然有可能产生一个突跃再走平的现象，我的结果是靠近参比要稍微好些。另外，我也是怀疑（怀疑哈，木有证据，不好乱说），文献报道的数据是不是用Origin之类的软件平滑的。
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18楼2011-05-27 14:40:25
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lifucheng at 2011-05-27 14:40:25:
嗯，请教不敢当，我就说说我的情况吧，其实我也没有做出葡萄糖氧化酶修饰电极的计时电流曲线，我当时选择的还原电位是-0.57V，做出的图反正很丑。后来想了下原因，可能与搅拌速度，通入氮气的量，加入的样品数 ...

谢谢。。。很受启发。。。但我还有个疑问。。。你在负电位下做i-t曲线也是通氮气吗？那反应如何连续进行？
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19楼2011-05-27 15:38:48
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
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Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 15:38:48:
谢谢。。。很受启发。。。但我还有个疑问。。。你在负电位下做i-t曲线也是通氮气吗？那反应如何连续进行？

嗯  情况是这样的  我也是通的氮气，但是因为现象不是很明显，所以就没有往下做了  具体的反应机理我也没有继续往下做
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20楼2011-05-27 17:06:26
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