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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

判断酶是否失活还可以用紫外检测下嘛。。。不过可能上去的酶量不够多。。。效果不明显。。。
11楼2011-05-27 10:10:20
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:47:12
说句题外话。。。酶有电活性的同时是否一定有生物活性。。。应该打个问号。。。就像有时候我们能做出在负电位下的DET。。。但是假如葡萄糖后没有催化响应。。。还是得依靠加入介体在正电位下做。。。是否真的是DET。。。值得探讨。。。
12楼2011-05-27 10:14:15
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songwangpan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 10:14:15:
说句题外话。。。酶有电活性的同时是否一定有生物活性。。。应该打个问号。。。就像有时候我们能做出在负电位下的DET。。。但是假如葡萄糖后没有催化响应。。。还是得依靠加入介体在正电位下做。。。是否真的是DE ...

不好意思,因为不清楚悬赏金币是一共20个,我以为是每人20,金币发完了,下次一定多送你点儿...
13楼2011-05-27 10:38:43
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songwangpan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 10:14:15:
说句题外话。。。酶有电活性的同时是否一定有生物活性。。。应该打个问号。。。就像有时候我们能做出在负电位下的DET。。。但是假如葡萄糖后没有催化响应。。。还是得依靠加入介体在正电位下做。。。是否真的是DE ...

不好意思,因为不清楚悬赏金币是一共20个,我以为是每人20,金币发完了,下次一定多送你点儿...
14楼2011-05-27 10:39:14
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songwangpan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xiao_lei12 at 2011-05-26 10:39:23:
在铁氰化钾溶液中用循环伏安法测试,出峰 ,只能说明你的电极没问题。
在电极上加入葡萄糖氧化酶后,在葡萄糖+PBS溶液中,用循环伏安法测试,你扫描的如果是正电位区,应该会有峰。这个峰是过氧化氢产生的。扫负 ...

不好意思,因为不清楚悬赏金币是一共20个,我以为是每人20,金币发完了,下次一定多送你点儿...
15楼2011-05-27 10:40:38
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

★ ★ ★
justinzhao(金币+3): 奖励应助 2011-05-27 11:47:04
嗯  我觉得要分成两个实验做:1. 如果在通氮除氧的PBS中作出GOD的氧化还原峰了,建议你先做扫速与峰电流、峰电位的关系实验。这个实验完成后,就可以向PBS中加入葡萄糖,搅拌,然后停止,在不搅拌的条件下在相同的电位窗口下做循环伏安实验,看此时的还原峰电流或者氧化峰电流有没有变化(增大或者减小都可以,有变化就行。我在通氮除氧的PBS得到的结果是加入葡萄糖后,还原峰电流增大)。2. 如果你在空白PBS中没有得到一对明显的氧化还原峰,就不用再加入葡萄糖了,因为没有峰出现就说明GOD根本没上去,即使加入葡萄糖也应该没有响应。

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16楼2011-05-27 11:14:14
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lifucheng at 2011-05-27 11:14:14:
嗯  我觉得要分成两个实验做:1. 如果在通氮除氧的PBS中作出GOD的氧化还原峰了,建议你先做扫速与峰电流、峰电位的关系实验。这个实验完成后,就可以向PBS中加入葡萄糖,搅拌,然后停止,在不搅拌的条件下在相同的 ...

你好,我看到很多文献都如你所说是加入葡萄糖后做CV看还原峰的减小,这个比较容易实现,但更直观的方法比如计时电流却不容易得到理想的阶梯状曲线,请教是何原因?谢谢!
17楼2011-05-27 13:32:11
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 13:32:11:
你好,我看到很多文献都如你所说是加入葡萄糖后做CV看还原峰的减小,这个比较容易实现,但更直观的方法比如计时电流却不容易得到理想的阶梯状曲线,请教是何原因?谢谢!

嗯,请教不敢当,我就说说我的情况吧,其实我也没有做出葡萄糖氧化酶修饰电极的计时电流曲线,我当时选择的还原电位是-0.57V,做出的图反正很丑。后来想了下原因,可能与搅拌速度,通入氮气的量,加入的样品数量都有关系。搅拌子最好选用那种比较长,但不是很粗的搅拌子,搅拌速率稍微快点;氮气气泡也不能太多,我有次用那种快要空了的气瓶,减压阀显示只有一格,通入溶液中的气泡大概一到两秒钟一个吧,得到的I-T曲线相对较好;另外,用微量进样器进样的时候,加入的溶液不要太靠近工作电极,不然有可能产生一个突跃再走平的现象,我的结果是靠近参比要稍微好些。另外,我也是怀疑(怀疑哈,木有证据,不好乱说),文献报道的数据是不是用Origin之类的软件平滑的。
18楼2011-05-27 14:40:25
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flower一休

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lifucheng at 2011-05-27 14:40:25:
嗯,请教不敢当,我就说说我的情况吧,其实我也没有做出葡萄糖氧化酶修饰电极的计时电流曲线,我当时选择的还原电位是-0.57V,做出的图反正很丑。后来想了下原因,可能与搅拌速度,通入氮气的量,加入的样品数 ...

谢谢。。。很受启发。。。但我还有个疑问。。。你在负电位下做i-t曲线也是通氮气吗?那反应如何连续进行?
19楼2011-05-27 15:38:48
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by flower一休 at 2011-05-27 15:38:48:
谢谢。。。很受启发。。。但我还有个疑问。。。你在负电位下做i-t曲线也是通氮气吗?那反应如何连续进行?

嗯  情况是这样的  我也是通的氮气,但是因为现象不是很明显,所以就没有往下做了  具体的反应机理我也没有继续往下做
20楼2011-05-27 17:06:26
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