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【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法 已有10人参与
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| 我是第一次发帖，也没有金币可以贡献，不过希望大家帮帮忙，我用的是分光光度计来测定葡萄糖氧化酶的酶活，可是每次测定的值和实际值相差很多，大家看看还有没有其他的方法可以测定葡萄糖氧化酶的酶活！谢谢各位大侠了！ |
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 酶工程 | 生工检测理论与实务 |
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我使用的检验原理是： 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成D-吡喃葡萄糖酸-1,5-内酯以及过氧化氢。就是利用反应生成的过氧化氢将还原性染料（邻联茴香氨）转化为氧化性染料，反应条件是25摄氏度，pH为7.0。 检测方法是： 将配置好的底物溶液（0.066mg/mL的邻联茴香氨溶液、10%葡萄糖溶液、过氧化氢溶液）放在25摄氏度水浴锅中平衡5分钟，然后加入稀释至0、2U/mL的葡萄糖氧化酶溶液，放入分光光度计中436nm下记录5min内吸光度值的郑家，根据线性曲线计算每分钟吸光度值的变化量（△E），根据公式：Volume activity（U/mL）=△E*3.72*稀释因子计算酶活 购买过来的葡萄糖氧化酶瓶身上有标记的酶活，然后我们将测得的酶活和标记的酶活做对比，计算百分比，但是每次我测得的百分比都要没有达到100%正负10%范围内，那说明我的酶活测定肯定有问题，酶蛋白是不需要测定的。 |
7楼2010-05-27 10:35:04
2楼2010-05-26 11:09:13
3楼2010-05-26 15:45:27
4楼2010-05-26 15:49:51
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