应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞培养
81/1返回列表
查看: 1310  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bbaibb.love

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】细胞培养 已有7人参与

大家好，我刚刚开始做细胞实验，用的是SW480细胞和MCF--7细胞，用DMEM培养液，师兄师姐以前养过，按他们的方法做，MCF--7细胞长得很好，可是SW480细胞复苏后细胞很快贴壁，传代后24小时，贴壁很少，慢慢地贴壁的那部分细胞也慢慢脱落，最后死光光。请各位指教，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-20 10:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以试试先用小瓶养，不行的话加大血清浓度，再不行的话换用质量更好的胎牛血清养，还不行的话就96孔饲养层培养，总之先长好再扩大。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-05-20 16:38:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-20 18:52:36
这个可能跟血清浓度有关，还有一个就是消化时间的问题。不同的细胞消化程度以及对胰酶的耐受程度也是不一样的。两种细胞不可以完全对待的。
赞一下(1人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
3楼2010-05-20 16:57:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinkang309

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-20 18:52:21
讲一点不太成熟的想法:首先你说你师兄师姐已经做过，而且做的比较好；但你的细胞却逐渐死亡，我分析可能原因有以下：1.确保你的操作是否有问题，2.你的培养试剂和器皿洁净灭菌是否有问题，3.你的培养条件和环境是否有较明显的变化，希望别见笑！
赞一下(2人) 回复此楼
天道酬勤
4楼2010-05-20 17:39:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

green-apple

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):感谢交流~~· 2010-05-20 21:34:27
你的试验操作叙述的不清楚，先试试这几点：
1. 细胞复苏后PBS(-)清洗3次，最后一次培养基重悬（注意解冻温度与时间）。
2. 用一次性培养皿或瓶，培养前明胶或多聚赖氨酸铺层，增强细胞贴壁能力。
3. 培养条件不变的话看看血清是否保存得当。
4. 如果有消化过程,而且有EDTA时一定要清洗细胞。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-05-20 21:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-21 13:02:49
传代后贴得少，是不是你的培养基里面没有加谷氨酰胺，不利于贴壁，
另外，我没养过你这种细胞，是不是比较娇贵贴壁不牢那种，你消化的时间不要太久了，吹打的时候温柔一点，不要用力过猛。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-05-20 22:30:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):不错的主意~~ 2010-05-21 13:03:36
这个要多方面找原因的，你可以让你师姐师兄看你重头到尾操作一遍，再找原因，有可能是胰酶消化的环节出问题了。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2010-05-21 11:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbaibb.love

新虫 (初入文坛)
多谢大家的指点！
回复此楼
8楼2010-05-23 15:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bbaibb.love 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-10 23:01 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 22:47 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-10 22:37 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:56 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:45 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:40 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:29 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:18 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:12 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:01 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 19:39 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭