24小时热门版块排行榜    

查看: 1174  |  回复: 7

bbaibb.love

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】细胞培养 已有7人参与

大家好,我刚刚开始做细胞实验,用的是SW480细胞和MCF--7细胞,用DMEM培养液,师兄师姐以前养过,按他们的方法做,MCF--7细胞长得很好,可是SW480细胞复苏后细胞很快贴壁,传代后24小时,贴壁很少,慢慢地贴壁的那部分细胞也慢慢脱落,最后死光光。请各位指教,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以试试先用小瓶养,不行的话加大血清浓度,再不行的话换用质量更好的胎牛血清养,还不行的话就96孔饲养层培养,总之先长好再扩大。
2楼2010-05-20 16:38:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-20 18:52:36
这个可能跟血清浓度有关,还有一个就是消化时间的问题。不同的细胞消化程度以及对胰酶的耐受程度也是不一样的。两种细胞不可以完全对待的。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
3楼2010-05-20 16:57:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinkang309

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-20 18:52:21
讲一点不太成熟的想法:首先你说你师兄师姐已经做过,而且做的比较好;但你的细胞却逐渐死亡,我分析可能原因有以下:1.确保你的操作是否有问题,2.你的培养试剂和器皿洁净灭菌是否有问题,3.你的培养条件和环境是否有较明显的变化,希望别见笑!
天道酬勤
4楼2010-05-20 17:39:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

green-apple

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):感谢交流~~· 2010-05-20 21:34:27
你的试验操作叙述的不清楚,先试试这几点:
1. 细胞复苏后PBS(-)清洗3次,最后一次培养基重悬(注意解冻温度与时间)。
2. 用一次性培养皿或瓶,培养前明胶或多聚赖氨酸铺层,增强细胞贴壁能力。
3. 培养条件不变的话看看血清是否保存得当。
4. 如果有消化过程,而且有EDTA时一定要清洗细胞。
5楼2010-05-20 21:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-21 13:02:49
传代后贴得少,是不是你的培养基里面没有加谷氨酰胺,不利于贴壁,
另外,我没养过你这种细胞,是不是比较娇贵贴壁不牢那种,你消化的时间不要太久了,吹打的时候温柔一点,不要用力过猛。
6楼2010-05-20 22:30:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):不错的主意~~ 2010-05-21 13:03:36
这个要多方面找原因的,你可以让你师姐师兄看你重头到尾操作一遍,再找原因,有可能是胰酶消化的环节出问题了。
7楼2010-05-21 11:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbaibb.love

新虫 (初入文坛)

多谢大家的指点!
8楼2010-05-23 15:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bbaibb.love 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见