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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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1970-01-01 08:00:00
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我们都爱小木虫

lzhwin

木虫 (正式写手)

yinsongna(金币+1): 2010-05-19 19:53:12
楼主的模板很珍贵或者很难得到吗?
点突变要重新设计引物,经过一轮超长时间的PCR,还要消化模板再转化、筛选,最后测序(还有可能错)。也算是个中等规模的实验了。

请楼主详细说明一下,重新扩增为什么比点突变麻烦?你只需要用原来的模板加上高保真酶重新做一次PCR,然后回收连接转化鉴定测序整个下来一周就OK了啊?

[ Last edited by lzhwin on 2010-5-19 at 17:11 ]
9楼2010-05-19 17:00:41
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jasco

木虫 (正式写手)


yinsongna(金币+1): 2010-05-19 11:29:52
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 18:54:53
突变试剂盒,或者突变处合成引物,通过串联pcr修复,

最简单的是重新扩增
2楼2010-05-19 11:27:07
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yinsongna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-05-19 11:27:07:
突变试剂盒,或者突变处合成引物,通过串联pcr修复,

最简单的是重新扩增

重新合成太费劲了 突变试剂盒貌似很贵,麻烦你可不可以给我说下突变处合成引物,是不是就是在突变的地方设计引物,然后重叠延伸PCR再做链接?
3楼2010-05-19 11:31:19
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lzhwin

木虫 (正式写手)

yinsongna(金币+1): 2010-05-19 12:43:49
不懂,既然是扩增突变,说明模板应该没问题吧?
重新扩一次不就行了
4楼2010-05-19 11:33:07
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