应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】已知基因序列如何克隆获得
51/1返回列表
查看: 2396  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】已知基因序列如何克隆获得 已有8人参与

已知某材料的某基因序列，含3'端尾巴。
      问题1。如何判断该序列是否含有5'端帽子？
     问题2.如果含有，怎么克隆获得该基因？
      老板说不做RACE也可以扩出来，有没有高手支招？多谢啦！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-13 17:54:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-13 22:53:44:

建个文库，就能得到想要的基因吗？未必吧，范围太大，花钱太多，目的基因却不能确定获得，而且获得的序列也不是全长，想得到全长，最后还是要走到RACE之类的实验上来

现在建一个cDNA全长文库公司做的话是3万左右吧。
我觉得文库的优点是你可以通过后续的筛库（杂交或同源克隆等）的策略克隆得到你想要的一类基因（可能许多个同源基因），至于是否是全长呢，一是看你的基因大小；另外就是文库的质量了。不行的话就拼接相关序列吧，回到了类似楼主的问题了。
另外，有了文库，也可以做其他的基因，大家都能用。
个人观点，欢迎讨论。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-05-13 23:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一头一尾设引物直接扩~
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-05-13 19:09:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-13 22:17:42
问题1 查一下阅读框，看看包不包含ATG，是否是完整的阅读框
也可以直接blast比对，也许就有同源基因的序列，如果和同源基因一样长，或者更长，就肯定到头了
问题2 如果具有完整的阅读框，就设计包含阅读框的引物进行扩增，可拿到完整的阅读框
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2010-05-13 20:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有cDNA全长文库的话就好了，现在大家怎么都喜欢做RACE呢，构建个文库不更好吗？效率高，一个实验室都可用。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-05-13 22:08:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭