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liujingj

新虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】关于制剂体外释放度HPLC测定问题？已有7人参与

各位药学的大侠们：
我的制剂做完体外释放度后需要用HPLC法检测释放液中的药物含量，流动相条件基本摸好了，由于药物完全释放出来浓度较大，测定时需要用流动相将释放液稀释后再进样。
所以在方法学验证时有很多疑问，我配制供试品和对照品溶液时，是用流动相稀释还是释放液和流动相的混合溶液呢？若单用流动相稀释觉得没有达到体外释放测定的目的，仅仅是含量测定方法验证了，但若用混合溶液又不知道是否符合规定？向各位求教了啊？

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1楼2010-04-27 13:59:44

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anoikis

木虫 (正式写手)

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既然是用HPLC测定药物的浓度，那么你应该知道，进样量是非常小的，不超过50uL吧，一般都是10ul或者20ul，这么小的进样量，不管你的样品是用流动相稀释还是释放介质稀释，进样后，有效成分或者杂质都会吸附在固定相（C18柱子上），然后被流动相冲洗出来进入检测器，所以，你的药物是在被检测的时候是在流动相体系环境中的。
换句话说，用流动相或者释放介质配置或者稀释对照品或者供试品都可以。但是，最好用单一的溶剂，不用将流动相或者释放介质混合起来配置。不同成分的体系，尤其含有有机相的时候，比例不同，混合后，体积会有所变化（这个地球人都知道吧），所以配置标准曲线的时候，要用单一的溶剂体系。

另外，进HPLC，样品含盐或者酸碱的量要尽可能少，虽然现在柱子都是耐酸碱的，但是大量的进样，还有会对柱子的寿命和柱效产生影响。

说了这么多，多给俩钱吧，我容易么我？！！！