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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白透析总是出现沉淀
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刘敬功

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白透析总是出现沉淀 已有9人参与

做蛋白透析是时用的缓冲液是50mM Tris,5%甘油，5mM巯基乙醇，但是总出现沉淀，该怎么办呢？
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1楼 2010-04-26 15:39:57
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
刘敬功(金币+1): 2010-04-27 16:24
刘敬功(金币+1): 2010-04-28 12:59
有巯基乙醇，想必一定会沉淀的
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2楼2010-04-26 15:41:22
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刘敬功

银虫 (小有名气)
那不用加巯基乙醇吗
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3楼2010-04-27 16:25:26
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司马诸葛

木虫 (正式写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
我做的蛋白质透析，都要加DTT
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4楼2010-04-27 21:47:28
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your2007

至尊木虫 (著名写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
巯基乙醇会使蛋白的二硫键被还原，氢键断裂，从而导致蛋白变性而发生沉淀现象，不过可以通过复性得到恢复。可以更换另外的缓冲液再次透析。
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爱人者被爱，敬人者人敬
5楼2010-04-27 22:13:21
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lls850225

银虫 (小有名气)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
我有时候也这样，加一些盐，大约200mM左右，如果对你的蛋白没有影响的话~再者，可以加大甘油的量，应该可以减少沉淀~
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6楼2010-04-28 10:41:13
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shawn2006

禁虫 (小有名气)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
本帖内容被屏蔽
7楼2010-04-28 11:09:11
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
过阵子做的时候和大家交流下啊，到时候希望大家多多帮助～
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8楼2010-04-28 11:43:45
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
原因之一是蛋白性质，有些蛋白在低盐时析出，当然PI也有影响
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9楼2010-04-28 12:12:49
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antibody01

金虫 (著名写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
巯基乙醇会使蛋白的二硫键被还原，氢键断裂，从而导致蛋白变性而发生沉淀现象，不过可以通过复性得到恢复。
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生活就像强奸，无法反抗就要学会享受； 工作就像轮奸，你不行就要别人上； 社会就像自慰，一切都要靠自己的双手解决。
10楼2010-04-28 12:45:00
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