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yinleidawn

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】为什么质粒转化后晒出的菌在原培养基上长不出 已有4人参与

我的大肠杆菌转化进去质粒后,在加了50ug/ml氨苄霉素的LB培养基上能够长出菌落,但是该菌落挑出后放回LB液体培养基却长不起来,这是什么原因呢?
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wwllkkhh

金虫 (小有名气)

不要挑取菌落四周的小菌斑(挑去菌落中心的),氨苄时间久了就失去抗性了,建议早点挑菌
牛~逼~哄~哄
5楼2010-04-26 13:28:07
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woke2008

新虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2): 2010-04-26 12:34
yinleidawn(金币+1): 2010-04-29 09:34
如果是无抗的LB液体培养基的话,不长就是操作问题或培养基问题(无抗的不小心都会污染的,何况还接了菌);如果是有抗性的话,那是因为你的平板上的单克隆是杂菌,转到抗性液体培养基时就会不长的!
忘记了该怎么忘记该怎么办!
2楼2010-04-26 10:52:41
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yinleidawn

铜虫 (初入文坛)

不会啊,我转过好几次,培养基也没有问题,因为没有转化的菌可以生长啊。。如果平板上的是杂菌的话,菌落形态看起来是大肠杆菌的没问题啊
3楼2010-04-26 10:54:58
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silicare

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lstt09nk(金币+1): 2010-04-26 12:32
氨苄放时间久了容易失效,抗氨苄的大肠杆菌也会将氨苄分解掉,所以要用新鲜转化的平板挑菌,避免挑到卫星菌落
4楼2010-04-26 11:59:46
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