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zxyjenny6

新虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

[交流] 【求助/交流】5500bp的片段PCR问题已有18人参与

各位大侠：本人最近在做一段5500bp的目的基因的PCR，采用的是takara的EX TAQ酶，选择的引物应该没有问题，按照相关原则设定了反应条件，并且在此基础上稍作改变尝试了几次，但都没有P出来。想请问各位，有没有什么好的建议或者应该怎样改进反应条件，能把我要的目的基因P出来。O(∩_∩)O谢谢！

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1楼 2010-04-24 15:25:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

徐官冲123

新虫 (小有名气)

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注册: 2014-04-10
性别: MM
专业: 病原细菌、细菌感染与宿主

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

9楼: Originally posted by zjzz at 2010-04-25 07:35:37
以前扩6K的片段用的是一种高延展的酶，哪家公司的我给忘了。
保真性如何不清楚，没测过序，因为只是做检测
一开始没扩出来，后来发现是提取的细菌总DNA不够好，可能是有机试剂没去干净
最后往体系里加了点DMSO就 ...

可以说下具体的量吗？