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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】测蛋白为什么测不出来 急
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】测蛋白为什么测不出来 急 已有4人参与

虫友们好  我在测血清里的蛋白含量  我定了总蛋白的试剂盒  是用双缩脲方法测的 一直在测  但是就是测不出含量  今天很是无奈就试了一下考马斯亮兰测蛋白  结果测出来了  含量还不低  很是奇怪  为什么同样的样品  而双缩脲法测不出来啊  急
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1楼 2010-04-22 22:32:00
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
高度怀疑方法问题，发一下你具体的操作步骤，大家分析一下
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2楼2010-04-23 08:04:46
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
你的操作有问题
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3楼2010-04-23 09:43:05
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-04-23 08:04:46:
高度怀疑方法问题，发一下你具体的操作步骤，大家分析一下

吸走上清液，用PBS洗了两次，加入0.01%的Triton X-100 500ul裂解，置于冰上反复冻溶30分钟，12000rpm/min,4℃，离心10min,取上清检测蛋白含量   请大家分析一下  谢谢
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4楼2010-04-25 21:51:16
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hihoney at 2010-04-23 09:43:05:
你的操作有问题

请多指教  我同学也帮我测过  是用双缩脲做的  结果是一样的   我请了一位老师帮我指导  结果还是没有做出来  我几近崩溃的边缘  很是无奈  请虫友帮帮忙
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5楼2010-04-25 21:53:33
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janelss

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
324520楼: Originally posted by xiaomi1208 at 2010-04-25 21:51:16
吸走上清液，用PBS洗了两次，加入0.01%的Triton X-100 500ul裂解，置于冰上反复冻溶30分钟，12000rpm/min,4℃，离心10min,取上清检测蛋白含量   请大家分析一下  谢谢...

用双缩脲测蛋白质的话 好像 Triton X-100 对测定有干扰
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6楼2012-06-21 19:30:26
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