| 查看: 2988 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
听雪看山木虫 (职业作家)
西游家族之T所长
|
[交流]
【求助/交流】单酶切载体竟然没切开，寻求原因？？ 已有5人参与
|
||
|
我用的载体是5500bp，酶是XmaI，去过磷酸化的。这个酶切已经做过n多次了，插入基因就是没办法和载体连接上，自连现象严重。当时以为是去磷酸化步骤的问题，然后就做过2次去磷酸化。 后来在做完酶切后做了一个转化，将50ng酶切液用电子穿孔仪转入感受态细胞，隔夜培养后发现n多菌斑，那就是意味着没有酶切成功，心里这个郁闷啊！ 我用的这个酶据说是比较难反应的，所以当时酶切都是隔夜至少10个小时以上了！！ 我现在真的是一点办法也没有了，本来就是新手，第一次做，竟然还碰到这么大的问题，3个月了，一点进展都没有，着急啊！ 恳请高手们给点建议，小虾米在这多谢了！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有271人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
听雪看山
木虫 (职业作家)
西游家族之T所长
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 1.037
- 金币: 2112.6
- 散金: 3557
- 红花: 43
- 沙发: 3
- 帖子: 3644
- 在线: 445.1小时
- 虫号: 509830
- 注册: 2008-02-23
- 性别: MM
- 专业: 植物营养学
16楼2010-05-05 17:41:06
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24338.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
2楼2010-02-08 22:04:25
听雪看山
木虫 (职业作家)
西游家族之T所长
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 1.037
- 金币: 2112.6
- 散金: 3557
- 红花: 43
- 沙发: 3
- 帖子: 3644
- 在线: 445.1小时
- 虫号: 509830
- 注册: 2008-02-23
- 性别: MM
- 专业: 植物营养学
3楼2010-02-08 22:25:47
4楼2010-02-09 01:22:17
